無(wú)菌工藝模擬風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估關(guān)鍵點(diǎn)

       無(wú)菌工藝

       在我們工藝驗(yàn)證與再驗(yàn)證過(guò)程中，經(jīng)以常會(huì)提到的一詞就是模擬工藝過(guò)程中有可能出現(xiàn)最差條件，也就是說(shuō)平時(shí)我們?cè)谧顑?yōu)的條件下生產(chǎn)，但在驗(yàn)證時(shí)要考慮在最差的條件下考察我們工藝的耐用性，考驗(yàn)在最差的條件下，工藝控制是否依然有效，從而證明正常生產(chǎn)條件下，工藝控制是更加可靠的。最差條件就是在我們工藝的邊緣進(jìn)行試探，而不需要超出邊界。

       在無(wú)菌工藝驗(yàn)證時(shí)，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的要求是工藝控制方式要定期進(jìn)行考察，正常生產(chǎn)條件下每半年應(yīng)進(jìn)行一次培養(yǎng)基模擬驗(yàn)證。使用含營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基代替產(chǎn)品來(lái)進(jìn)行無(wú)菌生產(chǎn)。工藝模擬的策略足以評(píng)估在實(shí)際的操作過(guò)程中工藝、環(huán)境、設(shè)備以及潔凈室操作人員對(duì)藥物產(chǎn)品潛在的污染性。

       以我單位無(wú)菌生產(chǎn)工藝模擬為例，首先是洗瓶崗位，洗瓶機(jī)清洗西林瓶需要經(jīng)過(guò)七個(gè)步驟。每個(gè)清洗步驟都裝有噴針裝置，能夠?qū)⑶逑此訅海瑢?duì)西林瓶的內(nèi)部實(shí)行高壓沖洗，保證清潔效果，清洗水和壓縮空氣在到達(dá)設(shè)備使用點(diǎn)前，要經(jīng)過(guò)終端過(guò)濾后保證可見(jiàn)異物得到有效阻隔，并且所有清潔用水，飲用水、純化水、注射用水不允許重復(fù)使用。

       西林瓶清洗結(jié)束后，自動(dòng)地傳送至隧道烘箱。隧道烘箱通過(guò)干熱滅菌350℃對(duì)清洗過(guò)的西林瓶進(jìn)行滅菌及去熱原。西林瓶自動(dòng)地進(jìn)入滅菌隧道后，將經(jīng)過(guò)如下三個(gè)工藝區(qū)：預(yù)熱段、加熱段、冷卻段。離開(kāi)隧道烘箱后，西林瓶進(jìn)入到分裝機(jī)的進(jìn)瓶轉(zhuǎn)盤(pán)上傳送至分裝機(jī)。

       分裝機(jī)用于把藥液分裝至西林瓶中。無(wú)菌藥液由分裝機(jī)的不銹鋼藥液桶供給。計(jì)量器將精確計(jì)量的藥液裝入西林瓶中。隨后膠塞壓入西林瓶。已滅菌的膠塞通過(guò)料斗進(jìn)入到壓膠塞振蕩器。

       半壓塞的膠塞進(jìn)入凍干機(jī)進(jìn)行冷凍干燥。干燥后再進(jìn)行全壓塞。壓塞后西林瓶通過(guò)輸送帶傳至壓蓋機(jī)進(jìn)行壓蓋密封。最后中間產(chǎn)品通過(guò)目測(cè)檢查后進(jìn)行最終包裝。

       風(fēng)險(xiǎn)分析：

       模擬介質(zhì)的選擇，針對(duì)不同的微生物應(yīng)選擇不同的培養(yǎng)基，比如硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基適用于需氧菌和厭氧菌，胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基適用于需氧菌和真菌。

       因?yàn)闊o(wú)菌藥品的生產(chǎn)都和空氣接觸，污染厭氧菌的幾率很小，而且被污染的微生物大多數(shù)為需氧菌或真菌。根據(jù)無(wú)菌水針制劑的生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)環(huán)境選擇，應(yīng)選用適用于大多數(shù)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。另外，當(dāng)產(chǎn)品無(wú)菌檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)厭氧菌時(shí)，考慮選擇硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基。

       在培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)中事先不知道系統(tǒng)中存在什么樣的微生物，但分別選擇多種培養(yǎng)基分別做無(wú)菌測(cè)試也較難做到。

       胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基粉具備以下條件：沒(méi)有抑菌作用；適應(yīng)大多數(shù)細(xì)菌的生長(zhǎng)；對(duì)設(shè)備沒(méi)有腐蝕性，對(duì)人體無(wú)害，對(duì)環(huán)境不發(fā)生污染。

       基于以上分析，根據(jù)產(chǎn)品分裝工藝對(duì)培養(yǎng)基的選擇適用性、澄清度、濃度和滅菌的適用性的比較之下，確定無(wú)菌生產(chǎn)工藝模擬選用的模擬介質(zhì)為胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基（或其它）。

       試驗(yàn)的結(jié)果受模擬介質(zhì)無(wú)菌性的影響很大，若不能保證它的無(wú)菌性，或在試驗(yàn)之前受到了污染，則不能保證試驗(yàn)結(jié)果的可信性。模擬介質(zhì)在使用之前應(yīng)滅菌。滅菌的方法很多，如γ射線滅菌，濕熱滅菌，過(guò)濾除菌等。基于經(jīng)驗(yàn)選用便捷安全有效的γ射線滅菌法。

       根據(jù)胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基粉的微生物負(fù)載確定γ射線的劑量，滅菌后進(jìn)行無(wú)菌性測(cè)試和靈敏度測(cè)試。

       包裝材料的選擇：西林瓶類(lèi)型和尺寸的選擇，正常生產(chǎn)中使用的西林瓶類(lèi)型和尺寸如下：

       以上表格顯示，對(duì)模制瓶進(jìn)行去熱源需要較高的溫度和較長(zhǎng)的時(shí)間。因此，為模擬最?lèi)毫訔l件，西林瓶的類(lèi)型選用模制瓶。

       15ml高硼硅玻璃模制注射劑瓶模制瓶的瓶口相比較大。較大的瓶口暴露的空間較大，從而產(chǎn)品染菌的風(fēng)險(xiǎn)越高。因此，為模擬最?lèi)毫訔l件，選擇最大瓶口尺寸的15ml中性硼硅玻璃模制注射劑瓶進(jìn)行模擬分裝。

       膠塞的選擇 ，常生產(chǎn)中使用的注射用無(wú)菌水針用鹵化丁基橡膠塞類(lèi)型和尺寸如下：

       較細(xì)的塞柱直徑與瓶子密封縫隙較大，從而產(chǎn)品染菌的風(fēng)險(xiǎn)越高。因此，為模擬最?lèi)毫訔l件，選擇最小塞柱直徑尺寸鹵化丁基橡膠塞進(jìn)行模擬分裝。鋁蓋類(lèi)型和尺寸的選擇，正常生產(chǎn)中使用的鋁蓋只有一種：抗生素用鋁塑復(fù)合蓋。

       惰性氣體，充氮產(chǎn)品的無(wú)菌工藝模擬應(yīng)進(jìn)行充氮模擬。灌裝樣品應(yīng)包括不低于20%（開(kāi)始時(shí)10%，結(jié)束時(shí)10%）充氮?dú)獾臉悠?，其余灌裝樣品使用無(wú)菌空氣代替氮?dú)狻?/p>

       分裝機(jī)速度的選擇，根據(jù)西林瓶的不同規(guī)格，分裝機(jī)的正常分裝速度為70~300瓶/min。已通過(guò)分裝機(jī)確認(rèn)證明在300瓶/min高車(chē)速時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn)穩(wěn)定，而分裝機(jī)的分裝速度越低，產(chǎn)品暴露的時(shí)間越長(zhǎng)，從而產(chǎn)品染菌的風(fēng)險(xiǎn)越高。因此，為模擬最?lèi)毫訔l件，分裝機(jī)的分裝速度選擇為最低速，即70瓶/min。

       注射用水灌裝量的選擇 ，溶液體積需足以涂在容器的內(nèi)表面，且不少于總?cè)莘e的1/3（即5ml）。本次灌裝體積選擇為10ml，考慮裝量誤差±1ml，注射用水裝量應(yīng)10±1ml。

       無(wú)菌培養(yǎng)基灌裝量的選擇，根據(jù)胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基使用說(shuō)明，濃度配比為3%（g/ml），所以標(biāo)準(zhǔn)裝量定為0.3g，考慮分裝設(shè)備可控制的裝量范圍確定裝量范圍為±14%。

       灌裝西林瓶數(shù)量的選擇，每班工作時(shí)間為12小時(shí)。除去模擬干擾時(shí)間（約xxx小時(shí)）和注射用水罐的組裝時(shí)間（約2小時(shí)），分裝的時(shí)間約為xxx小時(shí)。

       因此，灌裝西林瓶的理論數(shù)量為：

       Xxx小時(shí)x 60 min/h x 70 vials/min = xxx

       考慮到在實(shí)際工藝模擬測(cè)試中的不可預(yù)見(jiàn)性，灌裝西林瓶的數(shù)量應(yīng)不少于xxx。

       人員數(shù)量的選擇，所有被授權(quán)在生產(chǎn)時(shí)進(jìn)入關(guān)鍵區(qū)域分裝間的人員，包括生產(chǎn)操作人員、輔助人員、取樣人員以及維修人員，本次灌裝時(shí)確保其按照常規(guī)生產(chǎn)的職責(zé)模擬與其相關(guān)的動(dòng)作。正常生產(chǎn)時(shí)分裝室操作人員2人。本次灌裝時(shí)確保操作人員數(shù)量為規(guī)程中規(guī)定的最多人數(shù)4人。

       環(huán)境條件及監(jiān)測(cè)，模擬灌裝時(shí)的環(huán)境條件與實(shí)際生產(chǎn)操作條件一致，并按照日常環(huán)境監(jiān)測(cè)要求進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)。

       運(yùn)行持續(xù)時(shí)間，不少于一個(gè)完整產(chǎn)品批的實(shí)際生產(chǎn)操作時(shí)間。保存時(shí)間，在準(zhǔn)備階段將物料、灌裝部件和待灌裝的小瓶按照工藝要求在無(wú)菌條件下保存到被允許的最長(zhǎng)時(shí)間，設(shè)備清潔消毒、潔凈區(qū)域清潔消毒后、的保持時(shí)間大于按照工藝要求的最長(zhǎng)保持時(shí)間。

       干擾設(shè)計(jì)：

       培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)應(yīng)當(dāng)盡可能模擬常規(guī)的無(wú)菌生產(chǎn)工藝，包括所有對(duì)無(wú)菌結(jié)果有影響的關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。以使各種不同的生產(chǎn)實(shí)踐（應(yīng)盡可能模擬到極有可能發(fā)生的中斷或干擾，包括倒瓶、取樣、進(jìn)餐休息、故障維修）被模擬。干擾動(dòng)作的次數(shù)應(yīng)不少于實(shí)際生產(chǎn)可能發(fā)生的最多次數(shù)。

       結(jié)論，無(wú)菌生產(chǎn)工藝模擬條件的設(shè)計(jì)要考慮無(wú)菌生產(chǎn)工藝，進(jìn)行了模擬介質(zhì)、包裝材料（西林瓶、膠塞、鋁蓋）、惰性氣體、分裝機(jī)速度、注射用水及無(wú)菌培養(yǎng)基的裝量、灌裝數(shù)量、人員數(shù)量、環(huán)境條件及監(jiān)測(cè)、運(yùn)行持續(xù)時(shí)間、保存時(shí)間各方面條件的確定，模擬條件設(shè)計(jì)的策略要足以評(píng)估在實(shí)際的操作過(guò)程中工藝、環(huán)境、設(shè)備以及潔凈室操作人員對(duì)藥物產(chǎn)品潛在的污染性。

       在每半年的無(wú)菌生產(chǎn)工藝模擬前會(huì)對(duì)上一階段的生產(chǎn)狀況進(jìn)行總結(jié)和趨勢(shì)分析，綜合考慮再次設(shè)計(jì)有代表性的干擾類(lèi)型及次數(shù)。