全球7家耳聾基因療法企業(yè)齊發(fā)力，最快進展至1/2期

       有數(shù)據(jù)披露，患有致殘性聽力障礙的人口超過全球人口的5%。其中導(dǎo)致聽力損失發(fā)生的重要原因是遺傳因素，約占60%。目前，已經(jīng)有包括GJB2、PDS、OTOF等在內(nèi)的150多種耳聾基因得到鑒定，不過臨床上尚無能有效治療藥物。隨著生物醫(yī)藥技術(shù)的革新和發(fā)展，AAV基因療法目前被認為是治療遺傳性耳聾的頗具潛力的療法。

       不過，AAV基因療法治療遺傳性耳聾也是近年來才陸續(xù)進入臨床，相關(guān)研究報道數(shù)量增加。這可能跟多種原因有關(guān)，遺傳性耳聾的致病基因種類繁多，不同基因突變的致病機制各異，基因療法需要先對疾病機制有較為清晰的認知才能更好“對癥下藥”，且一些基因比較大超出了AAV的裝載能力。

       另外，盡管AAV有多種血清型，但天然存在的AAV血清型在組織嗜性上可能并不完全滿足治療遺傳性耳聾的需求，不同血清型的AAV對耳蝸內(nèi)細胞的感染效率和特異性存在差異，限制了其在臨床應(yīng)用中的廣泛性和有效性。

       再者，遺傳性耳聾涉及的靶細胞包括內(nèi)耳毛細胞、螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元等，這些細胞在耳蝸內(nèi)的分布和數(shù)量有限，且難以直接定位，需要進一步提升AAV載體的靶向性。同時，內(nèi)耳存在血-迷路屏障（blood-labyrinth barrier），這一屏障能夠阻止外來物質(zhì)進入內(nèi)耳，從而保護內(nèi)耳免受損傷，這也使得AAV載體在遞送過程中面臨較大的挑戰(zhàn)。

       然而令人振奮的是，近年來AAV載體不斷優(yōu)化，上述難題逐步得到解決，并開發(fā)包括雙載體遞送在內(nèi)的遞送策略，推動了AAV基因療法在治療耳聾上的發(fā)展。本文不完全統(tǒng)計了國內(nèi)外正在開發(fā)針對耳聾的AAV基因治療企業(yè)。

▲7家耳聾AAV基因療法布局企業(yè)（ 圖片來源：醫(yī)麥客整理）

       整體來看，布局這一領(lǐng)域的企業(yè)并不算多，國外進展快于國內(nèi)。當下大部分候選產(chǎn)品集中在OTOF基因上。OTOF介導(dǎo)的聽力損失又稱DNFB9先天性耳聾，是一種常染色體隱性遺傳疾病，是由編碼otoferlin的OTOF基因突變引起的一種感音神經(jīng)性聽力損失。而針對這一基因的耳聾，所采取的策略均是采用雙載體AAV，分別裝載OTOF基因的不同片段，然后在細胞內(nèi)重新組合，從而克服單個AAV載體裝載容量有限的問題。同時，雙載體AAV遞送系統(tǒng)可以優(yōu)化AAV載體的靶向性和細胞內(nèi)化效率，提高基因治療的整體效果。

       諾華的CGF166通過一種含有編碼人Atonal轉(zhuǎn)錄因子（Hath1）的cDNA的重組腺病毒5（Ad5）載體，將Aton1基因輸送到內(nèi)耳來治療雙耳重度到極重度耳聾。該療法的研究表明，耳毛細胞的生長受Atonal控制，該基因可作為一種“主開關(guān)”，通常在出生后關(guān)閉，而CGF166能將開關(guān)撥到“開”位置，從而刺激正常聽力所需的毛細胞生長。CGF166此前被報道早年前已經(jīng)進入1/2期臨床階段，近期并未查詢到該候選產(chǎn)品相關(guān)的進展

▲AK-OTOF機制（ 圖片來源：公開信息）

       AK-OTOF由Akouos公司研發(fā)，2022年10月，禮來公司斥資約6.1億美元收購了Akouos，以加速其聽力基因療法的開發(fā)進程。AK-OTOF利用了AAVAnc80這種對內(nèi)毛細胞具有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的衣殼，分別包裝近6kb的人類otoferlin cDNA，并遞送至內(nèi)耳蝸的毛細胞中，以替代突變的基因，從而恢復(fù)內(nèi)耳細胞的功能。2024年1月23日，Akouos公司宣布了AK-OTOF-101研究的初步臨床結(jié)果。在這項研究中，首位接受基因治療的11歲患者在AK-OTOF注射后30天內(nèi)經(jīng)歷了聽力的全面恢復(fù)。

       DB-OTO最初由再生元和Decibel Therapeutics合作開發(fā)，在去年Regeneron收購了Decibel Therapeutics，并得到了這一候選管線。該候選產(chǎn)品采用雙AAV1載體分別裝載OTOF cDNA的不同基因片段，采用耳蝸內(nèi)注射給藥，旨在通過AAV載體將OTOF基因的健康拷貝傳遞至耳蝸毛細胞。

       今年5月，再生元公布DB-OTO的1/2期CHORD試驗的初步積極結(jié)果：一名在11個月大時接受其在研基因療法DB-OTO的遺傳性耳聾患者，在24周內(nèi)聽力恢復(fù)到正常水平，而另一名在4歲時接受該療法的患者也在治療后6周時初步觀察到聽力有所改善。這兩名兒童都因OTOF基因變異而在出生時患有嚴重的遺傳性耳聾，其中接受治療的11個月大兒童是全球最早接受基因療法治療遺傳性耳聾的患者之一。除DB-OTO開發(fā)項目外，Decibel此前還布局了針對GJB2相關(guān)聽力損失患者的AAV.103和針對立體異位素（STRC）相關(guān)聽力損失患者的AAV.104療法。

▲SENS-501機制（ 圖片來源：官網(wǎng)）

       Sensorion的SENS-501是將OTOF基因拆分成兩部分，再分別包裝到兩個AAV載體中。其在進入細胞后，會重新拼接成完整的OTOF基因指導(dǎo)otoferlin的表達。該候選產(chǎn)品是Sensorion與巴斯德研究所合作的項目，啟動于2019年，已經(jīng)在臨床前研究中展現(xiàn)出了較好的潛力。今年1月，Sensorion宣布將率先在法國啟動1/2期臨床試驗。

       鼎新基因是國內(nèi)率先采用AAV雙載體遞送技術(shù)的基因治療公司，其探索了多種制劑配方來降低高濃度下的AAV聚集，提高AAV的生產(chǎn)質(zhì)量，結(jié)合雙載體策略，在此基礎(chǔ)上開發(fā)了候選藥物RRG-003，將otoferlin cDNA的5'-片段和3'-片段分別裝載在不同的AAV載體中，通過反向末端重復(fù)重組產(chǎn)生可以翻譯蛋白OTOF的轉(zhuǎn)錄物。其已經(jīng)披露的IIT數(shù)據(jù)顯示，RRG-003前5例受試者中4例受試者給藥后聽力明顯恢復(fù)，且有良好的耐受性和安全性。

       瑋美基因專注于新型AAV載體的開發(fā)及聽力缺失基因治療管線的推進，已成功開發(fā)出高效靶向毛細胞和支持細胞的病毒載體AAV-ie，AAV-ie對于耳蝸支持細胞的感染率顯著高于其他天然AAV型。目前，該企業(yè)已經(jīng)建立了AAVMeta載體開發(fā)平臺，借助該載體開發(fā)的藥物已經(jīng)進入臨床實驗階段。與此同時，瑋美基因也開發(fā)了用于耳蝸的新型AAV載體。

       此前，瑋美基因創(chuàng)始人鐘桂生及其研究團隊等人在Nature Communications上在線發(fā)表了題為AAV-ie enables safe and efficient gene transfer to inner ear cells的研究論文，該研究鑒定出一種新型AAV變體AAV-ie，可用于小鼠內(nèi)耳中的基因遞送，是對傳統(tǒng)AAV血清型的巨大改進。

       星奧拓維是一家專注于內(nèi)耳聽力損傷等相關(guān)疾病的創(chuàng)新藥生物技術(shù)公司，以雙AAV基因遞送、基因編輯和類器官等五大平臺，針對感音神經(jīng)性耳聾，開發(fā)基因遞送、基因編輯和內(nèi)耳毛細胞再生藥物。其針對OTOF基因開發(fā)了一款OTOV-101候選產(chǎn)品，是采用雙載體AAV遞送策略。

       去年11月，星奧拓維首席科學(xué)家、東南大學(xué)首席教授柴人杰團隊與合作單位在Advanced Science上在線發(fā)表題為“Pre-clinical efficacy and safety evaluation of AAV-OTOF in DFNB9 mouse model and non-human primate”的研究論文。他們創(chuàng)新性地開發(fā)了基于DNA重組技術(shù)的OTOF雙載體表達系統(tǒng)，該系統(tǒng)顯著提升了全長OTOF蛋白的穩(wěn)定與長效表達能力，成功在攜帶Otof點突變的成年小鼠模型中恢復(fù)了聽力功能，效果持久可達150天以上，部分個體甚至接近野生型小鼠的聽力水平。另外，研究人員還利用Anc80L65載體結(jié)合Myo15有效驅(qū)動了目標基因在毛細胞中的正確表達。

       整體來說，可以看到在基因療法針對耳聾疾病領(lǐng)域，近年來已經(jīng)取得了長足的發(fā)展，特別是針對OTOF基因突變的研究，目前也是進展最快的。在針對耳聾疾病上，企業(yè)采取的策略包括雙載體、開發(fā)新的高效率的AAV血清型、提升AAV產(chǎn)量等。同時，這些企業(yè)也在探索針對其他突變的耳聾基因療法，當下仍處于臨床前研究階段?？梢钥吹竭@一領(lǐng)域有了很大的突破，但仍有很長的路要走。