CDE文章 | 只要注意這幾點(diǎn)，多肽類仿制藥又有何難？

       隨著多肽合成工藝的成熟和藥物制劑技術(shù)的提高，多肽類藥物已成為國內(nèi)外藥物研發(fā)公司關(guān)注的重點(diǎn)。

       我國多肽類藥物開發(fā)起步較晚，原料藥的可及性、高端制劑的技術(shù)瓶頸等都制約了多肽類藥物的發(fā)展。

       隨著重大新藥創(chuàng)制專項(xiàng)和生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)“十二五”規(guī)劃的重點(diǎn)扶持，近幾年多肽類藥物技術(shù)難點(diǎn)有了重大突破，國內(nèi)多肽類藥物申報(bào)數(shù)量逐漸提高。但由于技術(shù)實(shí)力差異和多肽類藥物開發(fā)指導(dǎo)性文件的不完善，申請(qǐng)人遞交的申報(bào)資料質(zhì)量參差不齊，部分遞交資料存在嚴(yán)重缺陷，影響了此類產(chǎn)品的研制和注冊(cè)申報(bào)。

       本文結(jié)合國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《關(guān)于藥品注冊(cè)審評(píng)審批若干政策的公告》(2015年第230號(hào))、《關(guān)于仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)工作有關(guān)事項(xiàng)的公告》(2017年第100號(hào))、《化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求(征求意見稿)》等相關(guān)政策文件的要求，對(duì)已上市多肽類藥物存在的問題進(jìn)行了回顧，并對(duì)該類藥物在一致性評(píng)價(jià)、仿制藥申請(qǐng)中應(yīng)關(guān)注的問題進(jìn)行探討。

       01

       我國多肽類藥物現(xiàn)狀

       多肽類藥物在我國近幾年的銷售額均保持比較快速的增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)，其中奧曲肽、生長(zhǎng)抑素、曲普 瑞林、亮丙 瑞林等品種銷售額均過億元。但我國可自主生產(chǎn)的多肽類藥物產(chǎn)品初級(jí)、附加值低。目前，多數(shù)市場(chǎng)前景廣闊的藥物仍主要依靠進(jìn)口，如胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)類似物等，見表1。

       表1部分列舉了2000年之后在歐、美、中國上市的多肽類藥物，在腫瘤、抗感染、糖尿病、免疫等治療領(lǐng)域有較多的多肽類藥物上市。通過對(duì)比可見，多數(shù)藥物在我國的上市時(shí)間晚于歐美，部分專利過期且療效確切的藥物，在國內(nèi)尚無仿制品上市或僅有少數(shù)企業(yè)仿制生產(chǎn)。可能存在多種原因：

       ①原料藥的可及性。目前，國內(nèi)具備商業(yè)化生產(chǎn)高質(zhì)量多肽原料藥能力的企業(yè)較少，且具有原料藥生產(chǎn)能力企業(yè)所生產(chǎn)的原料藥多數(shù)僅供本公司制劑使用，市場(chǎng)上能購買到藥用級(jí)別高質(zhì)量的原料藥較少，在源頭上限制了多肽類藥物的發(fā)展。

       ②關(guān)鍵制劑技術(shù)尚需突破。部分特殊多肽制劑，如緩釋微球、脂質(zhì)體、吸入制劑等劑型，現(xiàn)國內(nèi)掌握上述制劑核心技術(shù)的企業(yè)較少，從另一方面制約了該類多肽藥物的上市。

       ③研發(fā)企業(yè)的關(guān)注度。由于多肽類藥物是介于大分子蛋白藥物和小分子化學(xué)藥物之間的一類特殊藥物，其研發(fā)、生產(chǎn)均具有一定的特殊難度。國內(nèi)大多數(shù)制藥企業(yè)未涉獵過此類藥物，對(duì)該類藥物的關(guān)注度較低，因此導(dǎo)致仿制數(shù)量比小分子化學(xué)藥物低很多。

       如化學(xué)小分子藥物帕瑞西布鈉，專利過期后，即有數(shù)十個(gè)企業(yè)申報(bào)生產(chǎn)，而多肽類藥物特利加壓素專利早已過期，目前國內(nèi)僅有個(gè)別仿制藥企業(yè)獲準(zhǔn)生產(chǎn)。

       國內(nèi)部分已上市的多肽類藥物上市時(shí)間較早，近年我國成為ICH成員國，藥品的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)與國際接軌，隨著我國藥品一致性評(píng)價(jià)工作全面展開，早期上市的多肽類藥物可能無法滿足一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求，已有生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)的多肽生產(chǎn)企業(yè)將面臨巨大的挑戰(zhàn)。

       02

       參比制劑的確定

       按照我國藥監(jiān)機(jī)構(gòu)發(fā)布的法規(guī)文件，仿制藥品應(yīng)與參比制劑保持質(zhì)量和療效一致。中共中央辦公廳、國務(wù)院辦公廳于2017年發(fā)布《關(guān)于深化審評(píng)審批制度改革鼓勵(lì)藥品醫(yī)療器械創(chuàng)新的意見》，明確要求我國應(yīng)逐步建立橙皮書制度，明確各藥品的參比制劑。

       由于仿制藥橋接了參比制劑質(zhì)量控制、安全性有效性信息，申請(qǐng)人在開發(fā)多肽仿制藥時(shí)，應(yīng)高度重視參比制劑的選擇。除了參考《關(guān)于發(fā)布化學(xué)仿制藥參比制劑遴選與確定程序的公告》(2019年第25號(hào))以外，還應(yīng)該對(duì)產(chǎn)品在國外上市時(shí)制劑處方合理性、臨床試驗(yàn)規(guī)范性科學(xué)性、說明書的權(quán)威性等進(jìn)行全面考察。

       以注射用縮宮素為例，分享參比制劑選擇時(shí)在藥學(xué)方面的一些考慮。在美國、歐洲和日本上市的縮宮素注射液，均有獲得國內(nèi)參比制劑資格的可能性，如美國App Pharmaceuticals，LLC、歐洲Mylan Products Ltd、日本武田薬品工業(yè)株式會(huì)社等公司產(chǎn)品。

       對(duì)于仿制注射劑，原則上Q1，Q2與參比制劑一致，即處方中輔料種類和用量一致；其次《化學(xué)藥品注射劑基本考慮(試行)》要求，在滿足需要的前提下，注射劑所用輔料的種類及用量應(yīng)盡可能減少。

       處方中是否含有乙醇是歐洲、美國、日本上市產(chǎn)品處方組成的主要差別。日本、美國上市產(chǎn)品中不含乙醇，歐洲上市產(chǎn)品中含有乙醇，同時(shí)檢索發(fā)現(xiàn)歐洲近期批準(zhǔn)產(chǎn)品中也不含乙醇，因此需對(duì)處方中乙醇的作用以及存在必要性進(jìn)行詳細(xì)分析，并結(jié)合產(chǎn)品上市前臨床研究和說明書等信息明確參比制劑。

       03

       多肽原料藥質(zhì)量

       多肽原料藥質(zhì)量控制相對(duì)復(fù)雜，在《制備工藝和過程控制對(duì)合成多肽藥物有關(guān)物質(zhì)的影響》和《合成多肽藥物質(zhì)控及雜質(zhì)譜研究》中闡述了如何結(jié)合保護(hù)氨基酸質(zhì)量控制、縮合過程控制、純化控制、中間體控制等綜合實(shí)現(xiàn)多肽類藥物的質(zhì)量控制。

       在此需要明確合成多肽藥物的過程控制更為重要，是多肽類仿制藥申請(qǐng)和一致性評(píng)價(jià)申請(qǐng)?zhí)嵘|(zhì)量的重點(diǎn)。

       在全面研究的基礎(chǔ)上，才可能實(shí)現(xiàn)對(duì)多肽類藥物的充分質(zhì)控，僅靠檢測(cè)手段可能無法有效評(píng)估產(chǎn)品質(zhì)量，以下分享2個(gè)可能引起多肽類藥物質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)的實(shí)例。

       對(duì)于小分子化學(xué)藥，合成路線不同造成雜質(zhì)譜的差異有限，經(jīng)過相應(yīng)的分析及研究基本可全面覆蓋潛在雜質(zhì)譜的差異。多肽類藥物不同于小分子化學(xué)藥，其合成路線較多，同一條肽鏈可以利用固相合成、液相合成、固相液相結(jié)合的片段合成等手段制備，即合成路線選擇較多，造成工藝雜質(zhì)與參比制劑存在較大差異。

       從目前申報(bào)資料上看，國內(nèi)基本采用從C端到N端逐步偶聯(lián)的手段制備，而多數(shù)國外原研企業(yè)采用固相合成制備多肽片段，再偶聯(lián)成整條肽鏈。暫且不分析合成路線合理性問題，但不同合成路線可能導(dǎo)致雜質(zhì)譜存在較大差別。

       以美國藥典收載的艾塞那肽為例，盡管藥典收載的有關(guān)物質(zhì)分析方法多達(dá)3種，但有部分申請(qǐng)人開發(fā)之后仍發(fā)現(xiàn)藥典收載方法存在不可檢出的工藝雜質(zhì)。

       藥典收載的方法可能主要源于原研品方法，由于仿制企業(yè)采用的合成路線不同，所產(chǎn)生的雜質(zhì)譜不一致。僅采用藥典或原研進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)物質(zhì)分析方法可能無法全面揭示仿制藥雜質(zhì)水平，進(jìn)而導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量存在風(fēng)險(xiǎn)。

       因此，對(duì)于多肽類藥物需進(jìn)行詳細(xì)的雜質(zhì)譜分析并采用相應(yīng)的雜質(zhì)對(duì)照品對(duì)分析方法的檢出能力進(jìn)行全面驗(yàn)證，僅采用已有的分析方法進(jìn)行考察，很可能造成雜質(zhì)漏檢等質(zhì)控缺陷。對(duì)于雜質(zhì)含量方面，需要注意某些雜質(zhì)即便滿足安全水平范圍，但也可能對(duì)多肽藥物的穩(wěn)定性存在較大影響。

       比如，某多肽類藥物收載于《中華人民共和國藥典》，藥典對(duì)有關(guān)物質(zhì)的要求為最大未知單雜不得過2.0%。

       在審評(píng)過程中發(fā)現(xiàn)按藥典收載方法檢測(cè)，參比制劑主峰后為單一雜質(zhì)峰，多數(shù)國產(chǎn)制劑主峰后存在2個(gè)雜質(zhì)峰，其中1個(gè)雜質(zhì)峰與參比制劑雜質(zhì)峰相對(duì)保留時(shí)間相同，應(yīng)該為同一雜質(zhì)，多出的雜質(zhì)峰為新增未知雜質(zhì)。雜質(zhì)含量未超過最大未知單雜的控制限度要求。

       盡管初始雜質(zhì)水平較低且符合藥典要求，但在穩(wěn)定性考察過程中，新增的未知雜質(zhì)增長(zhǎng)較快，12個(gè)月后已接近控制限度要求，而參比制劑主峰后仍基本維持一個(gè)雜質(zhì)峰。分析該雜質(zhì)可能是酰胺類水解雜質(zhì)，在體系內(nèi)殘留的少量雜質(zhì)可能發(fā)生類似“鏈引發(fā)”反應(yīng)，造成仿制產(chǎn)品的雜質(zhì)增長(zhǎng)水平遠(yuǎn)高于參比制劑。

       04

       多肽類藥物的結(jié)構(gòu)

       結(jié)構(gòu)是基礎(chǔ)，如果結(jié)構(gòu)上存在差異，仿制產(chǎn)品的活性可能弱于參比制劑，甚至沒有活性。

       多肽類藥物結(jié)構(gòu)確證與小分子藥物存在較大差別，可能具有高級(jí)結(jié)構(gòu)，常用可以反映多肽藥物結(jié)構(gòu)的方法如下。

       一級(jí)結(jié)構(gòu)確證方法：可以采用質(zhì)譜測(cè)定其分子量，用質(zhì)譜結(jié)合酶切進(jìn)行肽序的鑒定，或者采用Edman降解進(jìn)行肽序的鑒定。

       二級(jí)結(jié)構(gòu)確證方法：多肽二級(jí)結(jié)構(gòu)實(shí)際上是肽鏈因氫鍵而形成的局部結(jié)構(gòu)，研究手段有X-射線單晶衍射、二維NMR、FT-IR及遠(yuǎn)紫外CD等方法。其中X-射線單晶衍射及二維NMR測(cè)的最為準(zhǔn)確，但多肽的單晶不易培養(yǎng)，而且不代表溶液中的真實(shí)情況，而二維NMR耗時(shí)長(zhǎng)、解析困難，并且分析通量低，所以這2種方法一般用得較少；目前采用最多的是FT-IR與遠(yuǎn)紫外CD法。

       三級(jí)結(jié)構(gòu)確證方法：對(duì)于復(fù)雜多肽可能有三級(jí)結(jié)構(gòu)存在，三級(jí)結(jié)構(gòu)研究常用的方法有熒光光譜及近紫外CD等，其原理是利用芳香氨基酸側(cè)鏈的微環(huán)境變化帶來熒光發(fā)射光譜和近紫外CD譜的差異。

       但該方法目前只能進(jìn)行定性對(duì)比研究，無法進(jìn)行明確的結(jié)構(gòu)確證，只能作為三級(jí)結(jié)構(gòu)研究的參考。

       四級(jí)結(jié)構(gòu)確證方法：多肽及蛋白功能性聚集是高級(jí)結(jié)構(gòu)的一種反映，它包含兩方面信息:聚集單體的數(shù)量和聚集后的空間構(gòu)象。常用的分析方法包括場(chǎng)流分離、超速離心。

       生物活性研究方法：由于高級(jí)結(jié)構(gòu)確證可能存在一定的不確定性，可通過測(cè)試生物活性間接證明多肽類藥物高級(jí)結(jié)構(gòu)的正確性。如表2所統(tǒng)計(jì)已收入美國藥典的11個(gè)多肽類藥物有4個(gè)制劑和1個(gè)原料藥需要測(cè)定生物活性，越來越多的多肽類藥物需要增加生物活性的研究和檢測(cè)。

       目前，對(duì)于多肽及蛋白的活性研究有體外(in vitro)及體內(nèi)(in vivo)2種路徑。

       in vitro評(píng)價(jià)方法包括但不限于酶動(dòng)力學(xué)、結(jié)合力測(cè)定、生物活性測(cè)定。其中酶動(dòng)力學(xué)測(cè)定采用酶促反應(yīng)；結(jié)合力測(cè)定，如果是分子之間采用表面等離子共振技術(shù)(SPR)、生物膜層干涉技術(shù)(BLI)以及微量差示掃描量熱技術(shù)(NanoDSC)等技術(shù)完成，如果是和細(xì)胞表面的受體結(jié)合一般采用均相時(shí)間分辨熒光等技術(shù)完成；生物活性一般采用藥物刺激細(xì)胞，采用均相時(shí)間分辨熒光等技術(shù)檢測(cè)其產(chǎn)生的化學(xué)物質(zhì)來完成。

       in vivo評(píng)價(jià)一般采用動(dòng)物或動(dòng)物器官，如機(jī)理明確則檢測(cè)具體某種化合物指標(biāo)，如不明確則觀察具體的治療效果。例如可采用小鼠的EAE模型來評(píng)價(jià)醋酸格拉替雷對(duì)多功能硬化癥的癥狀延遲及減輕效果。

       對(duì)于多肽類藥物而言，結(jié)構(gòu)確證部分不同于小分子化學(xué)藥物。小分子化學(xué)藥物一般在原料藥部分明確結(jié)構(gòu)后，制劑開發(fā)中可不用進(jìn)一步研究。而多肽藥物由于高級(jí)結(jié)構(gòu)的不確定性，部分需要在制劑中與參比制劑進(jìn)行對(duì)比研究，以確定某一結(jié)構(gòu)含量與參比制劑的一致性。

       同時(shí)，由于多肽類藥物高級(jí)結(jié)構(gòu)與其所處環(huán)境有關(guān)，在結(jié)構(gòu)測(cè)試過程中可能脫離藥物實(shí)際使用環(huán)境，因此有必要采用多種相互補(bǔ)充的分析方法對(duì)比研究仿制品與參比制劑結(jié)構(gòu)的一致性。

       在此需要明確，并不是所有多肽類藥物都存在高級(jí)結(jié)構(gòu)，在合成中存在高級(jí)結(jié)構(gòu)的藥物僅占少數(shù)。在此建議產(chǎn)品開發(fā)者先通過參比制劑信息、文獻(xiàn)、專利等方面綜合檢索，明確是否存在高級(jí)結(jié)構(gòu)，再選擇適合的結(jié)構(gòu)確證手段進(jìn)行研究，避免過度開發(fā)。

       05

       多肽制劑研究

       多肽類藥物制劑絕大多數(shù)為注射劑，有少量口服制劑，如去氨加壓素、利那洛肽、索瑪魯肽等，有少量吸入制劑如去氨加壓素、鮭降鈣素等。

       本文主要結(jié)合《化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求(征求意見稿)》對(duì)多肽類藥物注射劑與小分子化藥存在的潛在差異進(jìn)行重點(diǎn)討論。

       處方工藝方面

       輔料選擇問題：盡管藥監(jiān)部門允許注射劑仿制藥在抑菌劑、緩沖劑、pH值調(diào)節(jié)劑、抗氧劑、金屬離子絡(luò)合劑等與參比制劑存在差異，但對(duì)于多肽制劑而言，所選擇輔料應(yīng)盡可能與參比制劑一致。

       主要原因有：肽鏈的穩(wěn)定性較差，酸、堿、金屬離子等可能引起肽鏈降解；肽類藥物結(jié)構(gòu)中存在多個(gè)裸露的氨基與羧基，可能會(huì)與輔料相互作用，形成相關(guān)的雜質(zhì)；多肽類藥物可能存在高級(jí)結(jié)構(gòu)，細(xì)微的pH值、離子強(qiáng)度的差異可能引起結(jié)構(gòu)的變化。

       配液過程：部分多肽類藥物對(duì)溶液pH值、氧含量、離子強(qiáng)度等敏感，在配制過程中，短時(shí)間脫離穩(wěn)定環(huán)境，會(huì)給多肽類藥物造成不良影響。

       對(duì)工藝細(xì)節(jié)的把握則更加關(guān)鍵，需對(duì)原輔料加入順序、攪拌時(shí)間、攪拌速度、是否需要避光除氧等進(jìn)行詳細(xì)的考察，確定是否對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成影響。

       如某多肽制劑，前期工藝開發(fā)過程中發(fā)現(xiàn)該藥物在相對(duì)較窄的pH值范圍內(nèi)穩(wěn)定，擬定關(guān)鍵工藝參數(shù)pH值控制范圍也相對(duì)較窄。在首次工藝驗(yàn)證中發(fā)現(xiàn)，配液之后pH值在擬定控制范圍內(nèi)，但所制備部分終產(chǎn)品pH值已超出擬定控制范圍。

       主要原因是批量放大后，商業(yè)生產(chǎn)設(shè)備的攪拌性能低，多肽類藥物的溶解時(shí)間延長(zhǎng)，藥物配置后pH值需在較長(zhǎng)時(shí)間后達(dá)到穩(wěn)態(tài)。對(duì)攪拌速度、時(shí)間等工藝參數(shù)進(jìn)行詳細(xì)考察后，實(shí)現(xiàn)了連續(xù)3批產(chǎn)品的穩(wěn)定生產(chǎn)。

       如某多肽制劑，3批工藝驗(yàn)證產(chǎn)品在12個(gè)月穩(wěn)定性留樣時(shí)，一批產(chǎn)品雜質(zhì)增加幅度明顯較另2批大，經(jīng)審查實(shí)際批生產(chǎn)記錄時(shí)發(fā)現(xiàn)，變化較大批次產(chǎn)品存在pH值回調(diào)問題。由于該產(chǎn)品工藝是將原料藥加入調(diào)好pH值的溶液中，回調(diào)之后體系離子強(qiáng)度增加，初步判斷是造成該降解現(xiàn)象的主要原因。

       申請(qǐng)人的補(bǔ)充研究顯示，如果體系中離子強(qiáng)度增加，加速試驗(yàn)可明顯發(fā)現(xiàn)藥物降解速度增加，因此在工藝規(guī)程中進(jìn)行了嚴(yán)格的限定，如pH值調(diào)節(jié)失敗，直接作為廢液處理，重新生產(chǎn)。

       凍干工藝問題：多肽類藥物受穩(wěn)定性限制，采用注射給藥途徑時(shí)多選擇凍干注射劑。從申報(bào)資料來看，多數(shù)申請(qǐng)人僅以可凍干為目的開展研究，忽視凍干工藝對(duì)穩(wěn)定性的影響。

       由于藥物在凍干過程中可能存在緩沖劑結(jié)晶、pH值位移、穩(wěn)定劑形態(tài)改變、多肽空間構(gòu)象改變等諸多問題，進(jìn)而可直接影響多肽類藥物的穩(wěn)定性。

       如某進(jìn)口多肽制劑，擬定凍干工藝需40℃保持較長(zhǎng)時(shí)間，由于藥物擬定貯藏條件是2～8℃保存，因此在審評(píng)過程中對(duì)該過程提出疑問，要求申請(qǐng)人進(jìn)一步提供凍干工藝的合理性。

       申請(qǐng)人提供了不同凍干工藝條件下產(chǎn)品穩(wěn)定性的比較數(shù)據(jù)，結(jié)果顯示二次升溫階段采用較高溫度時(shí)，產(chǎn)品長(zhǎng)期放置過程中降解雜質(zhì)明顯少于全程均在低溫條件下凍干的產(chǎn)品。

       該過程可認(rèn)為是凍干工藝中的“退火”，可以起到釋放藥物能量、改善微觀結(jié)構(gòu)等作用，進(jìn)而達(dá)到進(jìn)一步穩(wěn)定多肽類藥物的目的。美國Michael Pikal教授在該方面進(jìn)行了深入研究，可指導(dǎo)多肽類藥物凍干工藝的開發(fā)。

       特殊包裝形式問題：部分降糖藥物采用卡式瓶預(yù)灌封技術(shù)，該類藥物由于制備工藝和使用方法的特殊性，需建立特別的研究手段。

       如卡式瓶在生產(chǎn)過程中一般需硅化處理，硅化步驟直接影響內(nèi)壁的光滑程度，進(jìn)而影響給藥劑量的準(zhǔn)確性。

       應(yīng)對(duì)硅油噴涂量、均勻性等進(jìn)行相應(yīng)的控制；由于給藥方式的特殊性，如制劑中含有氣泡，會(huì)導(dǎo)致對(duì)壓力反應(yīng)的不一致，直接引起給藥劑量不準(zhǔn)確，可在灌裝過程中采取多次注入的方式以減少氣體的引入；該類藥物涉及多次刺穿等問題，需對(duì)包材密封性進(jìn)行完整的考察。

       相容性問題：部分多肽類藥物對(duì)生產(chǎn)設(shè)備可能引入的金屬雜質(zhì)較敏感，微量雜質(zhì)的引入可能引起肽鏈降解，導(dǎo)致仿制品的降解速度快于參比制劑。

       開展藥物與生產(chǎn)設(shè)備、濾器、藥物包材的相容性研究時(shí)，在小分子化藥關(guān)注研究?jī)?nèi)容的基礎(chǔ)上，研究者應(yīng)提高對(duì)金屬離子等無機(jī)雜質(zhì)的關(guān)注度。另外，多肽類藥物給藥劑量通常較小，為了保證藥物劑量的準(zhǔn)確性，需要關(guān)注生產(chǎn)設(shè)備、濾器、包材對(duì)藥物的吸附，必要時(shí)可采用過量投料的方式予以解決，但應(yīng)提供充分依據(jù)。

       如某多肽制劑，申請(qǐng)人在前期開發(fā)中發(fā)現(xiàn)擬定生產(chǎn)設(shè)備可引入金屬離子，導(dǎo)致產(chǎn)品降解速率明顯加快。由于生產(chǎn)設(shè)備更換難度較大，申請(qǐng)人擬定配液工序使用一次性配液袋，避免了金屬離子的引入，進(jìn)而保證了產(chǎn)品質(zhì)量。

       專屬溶媒、注射器問題：部分多肽參比制劑有專屬溶媒、專屬注射器具，仿制藥企業(yè)在開展研究時(shí)，需要關(guān)注藥物是否與臨床通用配伍溶媒、注射器存在相容性問題，應(yīng)充分評(píng)估專屬溶媒、注射器的必要性。

       如特利加壓素參比制劑，具有專屬溶劑氯化鈉水溶液，產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)附錄中對(duì)氯化鈉水溶液中氯化鈉濃度和pH值等做了較詳細(xì)的限定，目前臨床通用的配伍溶劑不滿足參比制劑擬定控制限度要求。

       國內(nèi)上市的注射用特利加壓素均未明確臨床配伍溶劑，因此在后續(xù)一致性評(píng)價(jià)等研究中需評(píng)估專屬溶劑的必要性及配伍使用過程中對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量及患者耐受性等多方面的影響。

       質(zhì)量研究方面

       研究者應(yīng)結(jié)合多肽藥物的自身特點(diǎn)，在質(zhì)量研究中進(jìn)行針對(duì)性考察。

       對(duì)于穩(wěn)定性差的多肽類藥物，應(yīng)關(guān)注pH值、性狀、復(fù)溶時(shí)間、初始雜質(zhì)水平等是否與參比制劑一致?？赡軙?huì)存在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制限度較寬，仿制品可滿足擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，但與參比制劑相比仍存在一定差異的現(xiàn)象。

       上述差異可能說明多肽類藥物所處的微環(huán)境與參比制劑存在差異，在長(zhǎng)期穩(wěn)定性考察中pH值、有關(guān)物質(zhì)、不溶性微粒等檢查項(xiàng)目有可能出現(xiàn)問題，研究者應(yīng)該重視上述差異，理解并查找原因，以免長(zhǎng)期穩(wěn)定性考察中出現(xiàn)問題，影響申報(bào)進(jìn)度。

       有關(guān)物質(zhì)是多肽類藥物制劑質(zhì)量研究的重點(diǎn)項(xiàng)目之一，制劑質(zhì)量研究應(yīng)結(jié)合原料藥有關(guān)物質(zhì)考察結(jié)果，關(guān)注對(duì)降解雜質(zhì)的考察，需要重點(diǎn)關(guān)注聚合物雜質(zhì)。

       多肽含有二硫鍵、裸露的氨基和羧基等，很容易因分子間二硫鍵或氨基羧基間的脫水形成聚合物。

       研究者應(yīng)明確高分子雜質(zhì)是由共價(jià)鍵形成的聚合物、分子間力形成的聚集體還是肽鏈固定的高級(jí)結(jié)構(gòu)。如是共價(jià)鍵形成的聚合物，則可能存在較大免疫原性風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)確定與參比制劑中該雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)一致性，并確保其含量在安全的限度以內(nèi)。

       穩(wěn)定性問題

       在對(duì)多肽類藥物開展穩(wěn)定性考察時(shí)，除常規(guī)考察項(xiàng)目外，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注配伍穩(wěn)定性研究，主要原因是多肽類藥物多在溶液狀態(tài)下穩(wěn)定性較差，配伍穩(wěn)定性更能體現(xiàn)出與參比制劑的質(zhì)量差別。

       部分多肽類藥物如按臨床實(shí)際使用藥液濃度，需稀釋較大倍數(shù)，按擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中分析方法可能無法檢測(cè)出產(chǎn)品真實(shí)的質(zhì)量變化情況。必要時(shí)可降低配伍溶液使用量，與參比制劑在相同的配伍濃度下進(jìn)行穩(wěn)定性比較，證明仿制品質(zhì)量不低于參比制劑。

       應(yīng)該重視的是，目前國內(nèi)上市的部分多肽類仿制藥物的貯藏條件比參比制劑更加苛刻，如卡貝縮宮素，參比制劑貯藏條件為不超過30℃，不能凍存。

       國產(chǎn)仿制藥貯藏條件為密閉，2～8℃保存。貯藏條件的差異提示產(chǎn)品的穩(wěn)定性可能存在差異，進(jìn)一步探討可能是由多肽仿制藥的原料藥、處方、生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)設(shè)備、包裝容器等綜合原因所致。

       上述問題體現(xiàn)仿制藥質(zhì)量未能達(dá)到與參比制劑一致，需要提升和改進(jìn)質(zhì)量，穩(wěn)定性應(yīng)與參比制劑一致，貯藏條件原則上應(yīng)不比參比制劑苛刻。

       06

       結(jié)語

       由于多肽類藥物是介于小分子化學(xué)藥物和蛋白藥物之間的一類特殊制劑，盡管研究開發(fā)存在一定困難，在對(duì)藥物風(fēng)險(xiǎn)充分識(shí)別的基礎(chǔ)上，建立相應(yīng)的控制措施，可有效保障產(chǎn)品質(zhì)量。