從特寶生物與Aligos合作，看siRNA在乙肝治療領(lǐng)域的進(jìn)展

       近日，廈門(mén)特寶生物（Amoytop）宣布與Aligos Therapeutics達(dá)成協(xié)議，擬利用后者的核酸技術(shù)開(kāi)展在肝炎治療領(lǐng)域的研究。

       根據(jù)協(xié)議條款，特寶生物和Aligos將合作研究和開(kāi)發(fā)用于治療肝 臟疾病的寡核苷酸化合物（siRNA）。特寶生物將獲得獨(dú)家許可，在大中華地區(qū)開(kāi)發(fā)和商業(yè)化產(chǎn)品，而Aligos將保留世界其他地區(qū)的權(quán)利。Aligos還將獲得預(yù)付款和研究合作資金，并有資格獲得總計(jì)1.09億美元的許可產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和銷(xiāo)售里程碑付款以及凈銷(xiāo)售額的分層特許權(quán)使用費(fèi)。

       siRNA研發(fā)進(jìn)展

       上世紀(jì)90年代初，RNA干擾（RNAi）現(xiàn)象首次在植物中被發(fā)現(xiàn)。1998年，研究人員在秀麗線蟲(chóng)中同樣觀察到抑制同源基因活性的雙鏈RNA效應(yīng)，并把這種現(xiàn)象命名為RNAi。2006年，這一發(fā)現(xiàn)榮獲了諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，并激發(fā)了全球小核酸藥物研發(fā)的熱潮。

       小核酸藥物具有靶點(diǎn)豐富、合成方便、研發(fā)周期短、不良反應(yīng)可控等優(yōu)勢(shì)，引起了人們廣泛關(guān)注。siRNA（小干擾RNA）作為RNAi藥物的重要形式，其作用機(jī)理為：長(zhǎng)雙鏈RNA和復(fù)雜的發(fā)夾前體被核糖核酸內(nèi)切酶分解為siRNA雙鏈片段，隨后雙鏈siRNA被拆分成過(guò)客鏈和引導(dǎo)鏈。在RNAi作用過(guò)程中，引導(dǎo)鏈與Argo蛋白家族中的Argo2在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)結(jié)合形成siRNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC），過(guò)客鏈隨后被降解。在鎂離子和ATP的參與下，RISC被激活與靶標(biāo)mRNA的同源區(qū)進(jìn)行特異性結(jié)合，結(jié)合的mRNA被切割和降解，從而抑制或影響靶基因的表達(dá)，導(dǎo)致靶蛋白的表達(dá)水平降低。

       siRNA沉默通路

圖片來(lái)源：Nature Reviews Drug Discovery

       siRNA藥物目前主要應(yīng)用于腫瘤和罕見(jiàn)病，目前已有多種針對(duì)罕見(jiàn)病的siRNA藥物獲批上市，如Patisiran（治療遺傳性轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性疾病）、Exondys51（杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良）、Spinraza（脊髓性肌萎縮癥）等。在腫瘤治療領(lǐng)域，也有多種抗癌siRNA藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)。

       除了腫瘤和罕見(jiàn)病外，近年來(lái)，siRNA藥物也在向普通疾病發(fā)力，如乙肝、眼部疾病、腎病等。其中siRNA技術(shù)的出現(xiàn)，為實(shí)現(xiàn)乙肝的功能性治愈，提供了強(qiáng)有力的工具。

       siRNA在乙肝治療領(lǐng)域的應(yīng)用

       乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的乙肝是全球公共衛(wèi)生的重要威脅。據(jù)世界衛(wèi)生組織發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，目前全球有超過(guò)3億人感染HBV，每年約有60萬(wàn)人死于HBV導(dǎo)致的肝 臟疾病。在國(guó)內(nèi)，慢性乙肝患者多達(dá)2800萬(wàn)人，大多數(shù)未接受正規(guī)治療。

       功能性治愈一直是乙肝治療的理想目標(biāo)。它是指停止治療后仍保持HBsAg（乙肝表面抗原）陰性、乙肝病毒DNA檢測(cè)不到、肝 臟生物化學(xué)指標(biāo)正常、肝 臟組織病變改善。

       HBsAg是HBV的外殼蛋白，是實(shí)現(xiàn)乙肝功能性治愈的關(guān)鍵標(biāo)志物。研究顯示，HBsAg轉(zhuǎn)陰與肝硬化甚至肝癌風(fēng)險(xiǎn)的降低密切相關(guān)。目前，國(guó)內(nèi)外指南推薦的乙肝治療臨床一線用藥主要是核苷類(lèi)藥物，包括拉米夫定、恩替卡韋、替比夫定和丙酚替諾福韋等，它們借助HBV逆轉(zhuǎn)錄酶整合嵌入病毒DNA，通過(guò)阻止病毒DNA的復(fù)制，達(dá)到降低HBV DNA水平的目的。不過(guò)這類(lèi)藥物只能控制病情，并不能清除病毒，一旦停藥就可能引起HBV病毒的反彈，甚至出現(xiàn)耐藥株。而且，核苷類(lèi)藥物對(duì)HBsAg沒(méi)有抑制效果，而較高的HBsAg 水平易誘導(dǎo)免疫耐受。

       因此，實(shí)現(xiàn)乙肝的功能性治愈存在巨大的未滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，一旦開(kāi)發(fā)出可實(shí)現(xiàn)乙肝功能性治愈的藥物，將具有不可估量的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

       siRNA能夠通過(guò)RNAi技術(shù)來(lái)干擾乙肝病毒的mRNA，破壞其作為轉(zhuǎn)錄后的翻譯模板功能，從而阻止相關(guān)病毒蛋白如HBsAg、HBeAg（乙肝E抗原）等的合成，抑制病毒顆粒形成。目前進(jìn)入臨床階段的國(guó)內(nèi)外采用siRNA技術(shù)治療乙肝的藥物如下：

部分在研乙肝siRNA藥物

來(lái)源：公開(kāi)資料

       AB-729

       AB-729是由Arbutus Biopharma Corporation研發(fā)的一款肝 臟靶向的候選RNAi療法，采用Arbutus的新型共價(jià)偶聯(lián)N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）遞送技術(shù)進(jìn)行肝靶向遞送。2022年7月，齊魯制藥與Arbutus公司宣布，雙方就乙肝治療藥物AB-729達(dá)成合作，齊魯制藥獲得AB-729在大中華區(qū)（包括中國(guó)大陸、香港、澳門(mén)、臺(tái)灣地區(qū)）的開(kāi)發(fā)和商業(yè)化權(quán)益，作為回報(bào)，Arbutus將獲得4000萬(wàn)美元的首付款以及高達(dá)2.45億美元的開(kāi)發(fā)、監(jiān)管和銷(xiāo)售里程碑付款。另外，Arbutus公司還有權(quán)獲得兩位數(shù)的分層特許權(quán)使用費(fèi)，及1500萬(wàn)美元的股權(quán)投資。

AB-729作用機(jī)理

來(lái)源：參考3

       臨床前研究顯示，AB-729可抑制HBV病毒復(fù)制，減少所有病毒RNA轉(zhuǎn)錄副本，并降低所有HBV抗原，并且顯示出HBV泛基因型活性。在Ib期研究中，AB-729使74%的患者HBsAg的滴度降到100IU/ml以下，治療48周后，降低幅度達(dá)1.9個(gè)Log值。目前，AB-729正在進(jìn)行一項(xiàng)II期試驗(yàn)，旨在評(píng)估AB-729聯(lián)合Peg-IFNα-2a（聚乙二醇干擾素α-2a）在核苷類(lèi)似物（NA）抑制的慢性HBV感染受試者中的安全性和耐受性。

       JNJ-3989

       JNJ-3989是一款皮下給藥siRNA療法，可與其他直接抗病毒 藥物聯(lián)用靶向HBV，實(shí)現(xiàn)乙肝患者的功能性治愈。在2021年的美國(guó)肝病研究學(xué)會(huì)年會(huì)（AASLD2021）上，Johnson&Johnson公布了JNJ-3989 在IIb 期臨床 REEF-1研究中的數(shù)據(jù)。結(jié)果顯示，JNJ-3989 200mg + NA 組滿(mǎn)足停藥標(biāo)準(zhǔn)的患者比例最高，達(dá)到 29.7%。

       ALG-125755

       ALG-125755是一種靶向HBsAg的siRNA藥物，臨床前研究顯示，與其他可注射的HBsAg抑制劑相比，ALG-125755具有良好的耐受性，且以更低的給藥頻率持續(xù)降低HBsAg 水平。

       目前，Aligos公司正在進(jìn)行一項(xiàng)I/Ib期臨床試驗(yàn)，以評(píng)估ALG-125755在健康受試者(第1部分)和慢性乙肝受試者(第2部分)單次遞增劑量，以及慢性乙肝受試者(第3部分)多劑量后的安全性、耐受性、藥代動(dòng)力學(xué)。

       HT-101

       HT-101是一款GalNAc偶聯(lián)的siRNA藥物。臨床前研究顯示，HT-101單次給藥后可顯著降低HBsAg、HBeAg以及DNA水平，尤其是在降低乙肝表面抗原（S抗原）水平方面，更是有著出色的表現(xiàn)，中、高劑量組均可以降低S抗原接近1000倍，并且藥效持續(xù)超過(guò)70天未見(jiàn)減弱。未來(lái)或?qū)⒋蟠筇岣呋颊咧委煹囊缽男?，同時(shí)也會(huì)降低治療成本。

       HRS-5635

       HRS-5635是恒瑞醫(yī)藥自主研發(fā)的siRNA藥物，臨床前研究顯示，HRS-5635對(duì)所有HBV基因型均顯示出優(yōu)異的抗病毒活性，在體內(nèi)可以發(fā)揮高效、持久的抗病毒作用，而且HRS-5635無(wú)脫靶活性，安全性高。今年3月28日，HRS-5635臨床試驗(yàn)申請(qǐng)獲CDE批準(zhǔn)，開(kāi)展用于慢性乙肝患者的臨床試驗(yàn)。

       小     結(jié)

       當(dāng)下乙肝藥物開(kāi)發(fā)主要以HBsAg的持續(xù)清除作為衡量功能性治愈的主要參考指標(biāo)，降低HBsAg是目前臨床治療的主要挑戰(zhàn)。siRNA技術(shù)是目前破除乙肝治療困境的最重要手段之一，未來(lái)一旦成功，將是乙肝治療范式的一大變革。

       參考來(lái)源

       1.Friedrich, M., Aigner, A.Therapeutic siRNA: State-of-the-Art and Future Perspectives. BioDrugs 36, 549–571 (2022). https://doi.org/10.1007/s40259-022-00549-3.

       2.劉義思, 陳新月. 治療慢性乙型肝炎新藥研發(fā)的研究進(jìn)展[J]. 臨床肝膽病雜志, 2022, 38(6): 1387-1392.

       3.Repeat dosing of the GalNAc-siRNA AB-729 in subjects with chronic hepatitis B results in robust and sustained HBsAg suppression. Retrieved June 27, 2021, from https://investor.arbutusbio.com/static-files/a7e1c49a-09eb-47a7-9e96-48fe9f7faef1.

       4.Arbutus and Qilu Pharmaceutical Enter into an Exclusive Licensing Agreement and Strategic Partnership to Develop and Commercialize AB-729. Retrieved Dec 13, 2021, from https://investor.arbutusbio.com/news-releases/news-release-details/arbutus-and-qilu-pharmaceutical-enter-exclusive-licensing.