萬字綜述 |免疫療法的后起之秀：腫瘤浸潤(rùn)性B細(xì)胞

       迄今為止，盡管免疫治療的研究主要集中在T細(xì)胞上，但越來越多的證據(jù)表明，腫瘤浸潤(rùn)性B細(xì)胞和漿細(xì)胞（統(tǒng)稱為腫瘤浸潤(rùn)性B淋巴細(xì)胞（TIL-Bs））在腫瘤抑制中具有至關(guān)重要的協(xié)同作用。在許多癌癥中，TIL-Bs在標(biāo)準(zhǔn)治療和免疫檢查點(diǎn)抑制的背景下都顯示出強(qiáng)大的預(yù)測(cè)和預(yù)后意義，利用其獨(dú)特的免疫特性為新的治療方向提供了前景。

       雖然該領(lǐng)域仍處于起步階段，但最新研究發(fā)現(xiàn)：TIL-B可以通過其獨(dú)特的抗原呈遞方式促進(jìn)T細(xì)胞的抗腫瘤免疫。它們?cè)诰奂途S持涉及T細(xì)胞、髓樣細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的免疫“熱”腫瘤微環(huán)境中發(fā)揮重要作用，并且它們具有通過緩解自我耐受機(jī)制的潛力。本文我們將探討與其他免疫細(xì)胞亞群協(xié)同增強(qiáng)TIL-B反應(yīng)最有前景的方法，以擴(kuò)大癌癥免疫治療的范圍和效力，延長(zhǎng)其持久性。

       介紹

       盡管在免疫檢查點(diǎn)抑制和過繼性T細(xì)胞治療的時(shí)代，T細(xì)胞在抗腫瘤免疫中的關(guān)鍵作用已變得無可爭(zhēng)議，但這些研究同樣揭示了T細(xì)胞反應(yīng)的許多局限性和脆弱性，促使我們迫切需要了解和利用正交免疫機(jī)制。

       大量新研究表明，腫瘤浸潤(rùn)性B細(xì)胞和漿細(xì)胞（PC）（統(tǒng)稱為腫瘤浸潤(rùn)性B淋巴細(xì)胞（TIL-Bs））是抗腫瘤反應(yīng)中強(qiáng)有力的多方面參與者。TIL-Bs本身很少被發(fā)現(xiàn)，而是與T細(xì)胞、髓樣細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞密切相關(guān)，在免疫性最強(qiáng)的“熱”腫瘤中，通常大大超過健康非淋巴組織中B系細(xì)胞的水平（圖1；見補(bǔ)充表1）。

       事實(shí)上，功能耗盡或功能失調(diào)的CD8+和CD4+TILs經(jīng)常表達(dá)B細(xì)胞招募的C–X–C基序趨化因子配體13（CXCL13），這表明，在面對(duì)腫瘤的持久性時(shí)，它們被編程為尋求B細(xì)胞幫助。這種相互作用最終可形成三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)（TLSs），即在腫瘤基質(zhì)中新生的淋巴結(jié)樣結(jié)構(gòu)，并積極參與啟動(dòng)和維持適應(yīng)性免疫反應(yīng)。

       與T細(xì)胞類似，在大多數(shù)癌癥中，TIL-Bs與陽性預(yù)后值相關(guān)（圖1；見補(bǔ)充表2）。此外，它們可以強(qiáng)烈增強(qiáng)CD4+和CD8+TILs的預(yù)后影響，這種效應(yīng)在含有TLSs4的腫瘤中表現(xiàn)得尤為明顯。不僅如此，TIL-Bs還包含多種表型，包括效應(yīng)B細(xì)胞和調(diào)節(jié)性B細(xì)胞（Breg細(xì)胞）亞群。

       圖1 健康和惡性腫瘤中的B細(xì)胞

       表1TIL-Bs識(shí)別的|抗原

       TIL-Bs表現(xiàn)出抗原識(shí)別的特征，包括體細(xì)胞高突變、類開關(guān)重組、克隆擴(kuò)增和分化為產(chǎn)生IgG或IgA的PC。盡管腫瘤反應(yīng)性CD4+和CD8+TIL通常識(shí)別突變蛋白質(zhì)（新抗原），但迄今為止確定的TIL-Bs的靶抗原主要是自身蛋白，表明腫瘤可以破壞B細(xì)胞的耐受性。事實(shí)上，B細(xì)胞和T細(xì)胞使用的正交耐受機(jī)制在癌癥治療中提出了引人入勝的免疫學(xué)問題和令人信服的治療方向。除了互補(bǔ)性之外，TIL-B 還具有很多的效應(yīng)機(jī)制，使它們不僅能夠增強(qiáng)適應(yīng)性免疫反應(yīng)，還能夠增強(qiáng)涉及補(bǔ)體、骨髓細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的先天機(jī)制。

       雖然B細(xì)胞和PC在癌癥免疫治療領(lǐng)域的研究很少，但它們?cè)谧陨砻庖叻矫嬉呀?jīng)取得了一些進(jìn)展，利用它們多管齊下的效應(yīng)機(jī)制來介導(dǎo)有效、持久且通常不可阻擋的靶組織破壞，有時(shí)具有顯著的選擇性。下文總結(jié)了我們目前對(duì)人類癌癥中TIL-Bs的理解，并強(qiáng)調(diào)了需要迫切關(guān)注的知識(shí)缺口。在了解了TIL-Bs在癌癥免疫的主要方面的作用后，探討了與其他免疫細(xì)胞亞群協(xié)同增強(qiáng)TIL-B反應(yīng)最有前景的方法，以擴(kuò)大癌癥免疫治療的范圍、效力和持久性，使新一代的癌癥免疫療法成為可能。

       1 B細(xì)胞的發(fā)育與耐受性

       B細(xì)胞在骨髓中產(chǎn)生并成熟，在那里它們經(jīng)歷V（D）J重組，導(dǎo)致IgM同型B細(xì)胞受體（BCRs）的細(xì)胞表面表達(dá)（圖2a）。高達(dá)75%的未成熟B細(xì)胞具有自我反應(yīng)性，并經(jīng)歷克隆缺失或受體編輯，其中產(chǎn)生第二個(gè)免疫球蛋白輕鏈，提供第二次降低自我反應(yīng)性的機(jī)會(huì)（圖2b）。盡管如此，仍有相當(dāng)大比例的自反應(yīng)性B細(xì)胞進(jìn)入外周，約占健康個(gè)體中成熟的幼稚循環(huán)B細(xì)胞的20%左右。這種自身反應(yīng)性B細(xì)胞庫被認(rèn)為是避免B細(xì)胞庫中出現(xiàn)巨大“缺口”的關(guān)鍵，否則這些缺口可能成為表達(dá)類似于宿主蛋白抗原的病原體的避風(fēng)港。

       事實(shí)上，自我反應(yīng)性B細(xì)胞可以通過克隆贖回過程參與對(duì)感染因子的反應(yīng)（圖2b）。外周血B細(xì)胞耐受性由多種機(jī)制維持，主要機(jī)制是CD4+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）的抑制作用與CD4+濾泡輔助性T細(xì)胞（TFH細(xì)胞）和其他T細(xì)胞亞群的刺激作用相平衡。

       Treg細(xì)胞的減少或TFH細(xì)胞的增加足以產(chǎn)生自身反應(yīng)性B細(xì)胞。因此，盡管B細(xì)胞和T細(xì)胞都受到中樞和外周耐受性的影響，但其確切機(jī)制和潛在的抗原庫是不同的，從而產(chǎn)生了互補(bǔ)的、相互依存的自我定義，這對(duì)抗腫瘤免疫具有重要意義。正如后面所討論的，有許多 TIL-B 識(shí)別自身抗原的例子（表 1；見補(bǔ)充表 3）。這表明許多 TIL-B 反應(yīng)確實(shí)涉及外周耐受機(jī)制的破壞（圖 2b），如在其他炎癥環(huán)境，例如急性和慢性感染。

       圖2 | B細(xì)胞分化和耐受性

       2 TIL-B表型的新興范圍

       高維流式細(xì)胞術(shù)和單細(xì)胞RNA測(cè)序（scRNA-seq）的出現(xiàn)使我們對(duì)B細(xì)胞成熟的理解從9個(gè)典型階段（圖2a）和7個(gè)核心標(biāo)記提升到了大量整合發(fā)育、功能和克隆信息的分子表型。有證據(jù)表明，健康人體血液中至少有 10 個(gè) B 細(xì)胞亞群，淋巴組織中有 12-13 個(gè)，外周器官中有 14 個(gè)。據(jù)報(bào)道，皮膚、腸道和肺上皮中存在組織駐留記憶B細(xì)胞，與組織駐留記憶T細(xì)胞類似，其特征是CD45RB和CD69的表達(dá)，并提供了抵抗再感染的第一道防線。

       在自身免疫領(lǐng)域，人們對(duì)缺乏IgD和CD27表達(dá)的所謂雙陰性B細(xì)胞非常感興趣。尤其是雙陰性B細(xì)胞的雙陰性2（DN2）亞群，其表現(xiàn)出T盒轉(zhuǎn)錄因子21（TBX21，或T-bet）+CD11c+C–X–C基序趨化因子受體5（CXCR5）-CD21- 表型，產(chǎn)生自身反應(yīng)性抗體，并與更具攻擊性的系統(tǒng)性紅斑狼瘡和其他疾病相關(guān)。

       至于記憶 PC，它存在于炎癥組織中，在細(xì)胞因子如 IL-6、IL-12、腫瘤壞死因子 (TNF) 和 1 型干擾素的支持下，可在小鼠模型中誘導(dǎo)慢性免疫病理學(xué)。

       文章還描述了 Breg 細(xì)胞在自身免疫、移植和感染中的作用。Breg 細(xì)胞比 Treg 細(xì)胞更難定義，因?yàn)樗鼈內(nèi)狈︻愃朴?Treg 細(xì)胞標(biāo)記叉頭盒蛋白 P3 (FOXP3) 的譜系標(biāo)記，并且它們可以在 BCR 參與的影響下從任何 B 細(xì)胞發(fā)育階段產(chǎn)生，Toll-like 受體 (TLR)–CD40 共刺激或細(xì)胞因子暴露。Breg細(xì)胞主要由其效應(yīng)分子定義，其中主要是IL-10以及IL-35、腫瘤生長(zhǎng)因子-β（TGFβ）和顆粒酶B（GZMB）。Breg細(xì)胞對(duì)CD4+和CD8+T細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和單核細(xì)胞具有抑制作用，同時(shí)對(duì)Treg細(xì)胞和不變的自然殺傷T細(xì)胞起作用。

       對(duì)人類癌癥的早期研究表明，TIL-B表型包括原始、活化和記憶B細(xì)胞、生發(fā)中心B細(xì)胞，PC及其中間產(chǎn)物。一些研究描述了非典型CD27? TIL-Bs中的記憶B細(xì)胞，可對(duì)應(yīng)于上述雙陰性B細(xì)胞。此外，耗盡的TIL-B表型（CD69+CD27-CD21-)與肺癌患者的Treg細(xì)胞相關(guān)。最近對(duì)患者腫瘤組織的 scRNA-seq 研究報(bào)告了從原始 B 細(xì)胞到 PC 的整個(gè)連續(xù)體的 2 到 13 種 TIL-B 表型。

       總的來說，迄今為止所描述的TIL-B表型與健康供體中確定的典型B細(xì)胞亞群一致（圖2a），盡管TIL-B在其中一些亞群中表現(xiàn)出更大的多樣性。通過scRNA-seq，最異質(zhì)的TIL-B亞群是記憶B細(xì)胞，它們通常根據(jù)其類別開關(guān)和CD27狀態(tài)進(jìn)行聚類，而PC則根據(jù)免疫球蛋白同種型進(jìn)行聚類。生發(fā)中心B細(xì)胞（可能來源于TLS）可形成與光、過渡和暗區(qū)表型相對(duì)應(yīng)的簇。

       已經(jīng)在人類腫瘤中對(duì)Breg細(xì)胞進(jìn)行了描述，并且與在自身免疫中觀察到的類似：Breg細(xì)胞可以來自于記憶B細(xì)胞、漿母細(xì)胞和漿細(xì)胞。值得注意的是，到目前為止，只有兩項(xiàng)scRNA-seq研究報(bào)道了Breg細(xì)胞。這可能在一定程度上反映了一個(gè)生物信息學(xué)問題，因?yàn)樵谌橄侔┲邪l(fā)現(xiàn)了表達(dá)IL10、GZMB和PDCD1的TIL-Bs，但沒有形成一個(gè)獨(dú)特的表型集群。因此有必要為人類癌癥中的Breg細(xì)胞定義更可靠的標(biāo)記物，以便了解其特性及治療它們的脆弱性。

       有各種因素可以影響TIL-Bs的表型，包括疾病分期和腫瘤類型（圖1）。例如，在更晚期的肺癌中觀察到了從原始的B細(xì)胞向PC樣B細(xì)胞的轉(zhuǎn)變，這強(qiáng)調(diào)了在預(yù)后研究中將分期作為混雜因素的必要性。TIL-B表型在同一癌癥的自發(fā)模型和移植模型之間可能不同，這是小鼠研究的一個(gè)重要考慮因素。

       抗原是另一個(gè)重要因素。例如，TLSs和生發(fā)中心B細(xì)胞富含HPV+而不是HPV- 頭頸癌，并且在小鼠乳腺癌模型中，腫瘤突變負(fù)荷的增加增強(qiáng)了B細(xì)胞和PC的浸潤(rùn)。

       一項(xiàng)使用癌癥小鼠模型的研究表明了細(xì)胞-細(xì)胞相互作用的重要性，在該研究中，腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞通過TNF和TNF配體超家族成員13B（TNFSF13B或BAFF）等細(xì)胞因子誘導(dǎo)B細(xì)胞募集和分化為 PC。最后，Breg細(xì)胞分化與肝細(xì)胞癌腫瘤微環(huán)境（TME）中半成熟樹突狀細(xì)胞的相互作用有關(guān)，與乳腺癌、肺癌和卵巢腺癌中腫瘤源性自噬體刺激TLR2，乳腺癌中腫瘤源性白三烯B4 以及乳腺癌、宮頸癌、卵巢癌和結(jié)直腸癌中GZMB+Breg細(xì)胞的IL-21有關(guān)。

       對(duì)scRNA-seq提供的TIL-B表型的日益了解開始轉(zhuǎn)化為超越CD20等簡(jiǎn)單標(biāo)記的預(yù)后研究。例如，一項(xiàng)針對(duì)鼻咽癌患者腫瘤組織的scRNA-seq研究發(fā)現(xiàn)，雙陰性B細(xì)胞和PC分別與生存率呈負(fù)相關(guān)和正相關(guān)。相反，一項(xiàng)結(jié)直腸癌scRNA-seq研究發(fā)現(xiàn)，在癌癥基因組圖譜（TCGA）共群中，IgA+IGLC2+PC亞群與預(yù)后不良相關(guān)，可能對(duì)應(yīng)于先前描述的免疫抑制IgA+細(xì)胞亞群。需要更多涉及其他腫瘤類型的研究來闡明新發(fā)現(xiàn)的TIL-B表型對(duì)抗腫瘤免疫和臨床結(jié)果的貢獻(xiàn)。

       3 TIL-B鄰域

       與腫瘤浸潤(rùn)性T細(xì)胞類似，TIL-B至少存在于TME的三個(gè)不同結(jié)構(gòu)區(qū)：組織高度有序的TLS，類似于淋巴結(jié)；組織較少的基質(zhì)浸潤(rùn)，涉及TIL-Bs、T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，我們這里稱之為淋巴-髓樣聚集物（LMA）；上皮內(nèi)浸潤(rùn)，TIL-Bs、T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞直接接觸（圖3）。我們將討論在每一個(gè)隔間中對(duì)TIL-Bs的了解，強(qiáng)調(diào)我們理解中的主要差距和爭(zhēng)議。

       圖3 TIL-B鄰域。a–d

       4 三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)

       TLS是一種淋巴結(jié)樣結(jié)構(gòu)，對(duì)抗原和炎癥刺激作出反應(yīng)，在熱腫瘤的基質(zhì)中重新出現(xiàn)。雖然術(shù)語TLS被一些人用來描述任何淋巴聚集，但我們建議使用更嚴(yán)格的定義，至少包括含有CD21+濾泡樹突狀細(xì)胞（FDCs）的清晰劃分的B細(xì)胞濾泡和含有常規(guī)樹突狀細(xì)胞和高內(nèi)皮微靜脈（HEVs）的相鄰T細(xì)胞區(qū)（圖3a）。在一些TLS中，B細(xì)胞濾泡包含由特征（和標(biāo)記）定義的生發(fā)中心，如激活的FDC（CD21、CD23）、經(jīng)歷增殖和體細(xì)胞超突變的B細(xì)胞（Ki67、B細(xì)胞淋巴瘤6蛋白（BCL6）、激活誘導(dǎo)的胞苷脫氨酶（AICDA））、TFH細(xì)胞（CD4、BCL6、誘導(dǎo)性T細(xì)胞共刺激（ICOS）、PD-1）、漿細(xì)胞和PCs。在最近的一項(xiàng)乳腺癌研究中，生發(fā)中心的存在與TLSs70中TFH細(xì)胞與濾泡Treg細(xì)胞的良好平衡有關(guān)。與淋巴結(jié)類似，無生發(fā)中心的TLS與有生發(fā)中心的TLS分別被稱為初級(jí)濾泡TLS和次級(jí)濾泡TLS 。

       盡管有許多相似之處，但 TLS 顯示出與淋巴結(jié)的結(jié)構(gòu)差異，這可能對(duì) TIL-B 反應(yīng)有重大影響。TLS缺乏膠囊，這可能會(huì)導(dǎo)致更多的免疫調(diào)節(jié)因子和TME的凋亡和/或壞死。TLS的非包膜結(jié)構(gòu)和近端位置可促進(jìn)低豐度或高度上下文依賴性抗原（例如，翻譯后修飾抗原）的攝取和呈現(xiàn)。這些特征還可以使B細(xì)胞和 其他TLS相關(guān)抗原呈遞細(xì)胞（APC）更好地獲得組織特異性自身抗原，從而促進(jìn)維持自身耐受。

       同樣，TLS缺乏被膜下竇巨噬細(xì)胞，而被膜下竇巨噬細(xì)胞在向淋巴結(jié)中的B細(xì)胞遞呈抗原中起著不可或缺的作用。目前尚不清楚腫瘤相關(guān)TLS是否包含結(jié)構(gòu)良好的導(dǎo)管，這些導(dǎo)管在淋巴結(jié)中運(yùn)輸可溶性抗原，還是包含支持B細(xì)胞和T細(xì)胞相互作用的基質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)，包括生發(fā)中心產(chǎn)生CXCL12的網(wǎng)狀細(xì)胞和T細(xì)胞區(qū)中的成纖維細(xì)胞網(wǎng)狀細(xì)胞。事實(shí)上，腫瘤相關(guān)的生發(fā)中心通常缺乏明確的暗區(qū)和亮區(qū)，這在正常淋巴結(jié)中是BCR親和力成熟過程的組成部分。因此，可以合理推測(cè)，與淋巴結(jié)相比，TLS可能產(chǎn)生具有不同抗原特異性的TIL-B反應(yīng)。

       除了眾所周知的能力產(chǎn)生高親和力抗體對(duì)外來抗原，生發(fā)中心發(fā)揮重要作用在減輕雙重風(fēng)險(xiǎn)體細(xì)胞高突變和親和力成熟構(gòu)成自我耐受方面：新BCR突變可以無意中賦予自動(dòng)反應(yīng)，和B細(xì)胞在基線可以成為激活和經(jīng)歷體細(xì)胞高突變的過程中克隆救贖。為了維持耐受性，健康組織中的淋巴結(jié)和生發(fā)中心有復(fù)雜的機(jī)制來檢測(cè)、抑制、編輯和刪除自身反應(yīng)性B細(xì)胞(圖2b)。B細(xì)胞、TFH細(xì)胞和濾泡Treg細(xì)胞之間的相互作用對(duì)減少自身反應(yīng)性B細(xì)胞的存在和/或活性至關(guān)重要，任何一種細(xì)胞的破壞都足以促進(jìn)自身抗體的產(chǎn)生。與癌癥患者特別相關(guān)的是，PD-1和細(xì)胞毒 性T淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4(CTLA4)通路也是這一過程的重要組成部分。我們對(duì)腫瘤相關(guān) TLS 執(zhí)行這些復(fù)雜功能的效率知之甚少，其中自我和非自我之間的差異可能像單個(gè)氨基酸變化、翻譯后修飾或簡(jiǎn)單地說 ，過度表達(dá)。從積極的一面來看，TLS可能是一個(gè)自我耐受機(jī)制充分放松的地方，允許產(chǎn)生自身反應(yīng)性抗體，抵消新抗原和其他腫瘤特異性抗原的免疫編輯效應(yīng)（圖4）。消極方面，TLS可產(chǎn)生自身反應(yīng)性B細(xì)胞和PC，這是與免疫檢查點(diǎn)阻斷相關(guān)的自身免疫介導(dǎo)毒 性的基礎(chǔ)，在罕見的情況下，還可產(chǎn)生副腫瘤綜合征。事實(shí)上，據(jù)報(bào)道，TLS與卵巢癌中的副腫瘤綜合征之間存在關(guān)聯(lián)。在開發(fā)旨在增強(qiáng)TLS的免疫療法時(shí)，需要考慮這些風(fēng)險(xiǎn)。

       圖4 癌癥分子內(nèi)表位從新表位擴(kuò)散到自身表位的模型。

       5 淋巴-骨髓聚集

       如上所述，我們提出了通用術(shù)語“淋巴-骨髓聚集”來描述腫瘤中發(fā)現(xiàn)的TIL-Bs、T細(xì)胞和骨髓細(xì)胞的各種非濾泡聚集，預(yù)計(jì)未來的研究將揭示具有不同功能的LMA亞型（圖3b，c）。LMA 總是存在于 TLS 陽性腫瘤中，但它們具有更廣泛的分布，包括幾乎所有免疫熱腫瘤。以下是值得考慮的已知或預(yù)期 LMA 子類的示例：

       1、早期、不成熟、停滯或收縮TLS。

       毫無疑問，在腫瘤中發(fā)現(xiàn)的一些LMA與真正TLS的前體相對(duì)應(yīng)。此外，由于TLS是短暫的抗原依賴性結(jié)構(gòu)，如果同源抗原從TME中消失，它們可能會(huì)經(jīng)歷收縮階段。雖然涉及實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的TLS的小鼠模型為這些階段提供了有用的見解，但該領(lǐng)域需要自發(fā)的原位腫瘤模型，以產(chǎn)生自然的TLS反應(yīng)，如在人類癌癥中所見。

       2、卵泡外反應(yīng)區(qū)。

       B細(xì)胞活化、分化和親和力成熟也可以發(fā)生在次級(jí)淋巴器官或炎癥周圍組織的生發(fā)中心以外的所謂濾泡外反應(yīng)中。炎癥組織中的濾泡外反應(yīng)與稱為T外周輔助細(xì)胞（TPH）的CD4+T細(xì)胞亞群有關(guān)，而不是TFH細(xì)胞。TFH細(xì)胞和TPH細(xì)胞均為PD-1高表達(dá)細(xì)胞，表達(dá)CXCL13和IL-21；然而，TPH細(xì)胞通常對(duì)BCL6和CXCR5呈陰性。值得注意的是，這些定義是不確定的，因?yàn)槲覀儗?duì)非規(guī)范TFH樣細(xì)胞的理解在繼續(xù)加深。在自身免疫中，濾泡外反應(yīng)涉及活化的B細(xì)胞、漿細(xì)胞和雙陰性B細(xì)胞以及TPH細(xì)胞。雖然尚未在癌癥中正式描述濾泡外反應(yīng)，但發(fā)現(xiàn)TIL-Bs與乳腺癌早期TLS中具有PD-1high-bethighbHbCl6lowCxCR5-表型的產(chǎn)生CXCL13的CD4+T細(xì)胞相關(guān)，最近在鼻咽癌中也有類似發(fā)現(xiàn)。

       3、抗腫瘤效應(yīng)區(qū)。

       雖然抗體依賴性細(xì)胞毒 性（ADCC）和抗體依賴性細(xì)胞吞噬作用（ADCP）被廣泛視為TIL-Bs的重要效應(yīng)機(jī)制，但這些活性的結(jié)構(gòu)背景在癌癥中仍不明確。在人類卵巢癌中，大基質(zhì)LMA被描述為TIL-Bs、T細(xì)胞和大噬菌體聚集并混合。這些是巨噬細(xì)胞和鄰近腫瘤細(xì)胞強(qiáng)烈表達(dá)PD-L1的部位，表明T細(xì)胞活性高，并產(chǎn)生相關(guān)的干擾素-γ（IFNγ）。鑒于這些PD-L1+區(qū)的強(qiáng)大、有利的預(yù)后意義，它們是由TIL-B衍生抗體刺激的ADCC和/或ADCP位點(diǎn)的有力候選。

       4、漿細(xì)胞富集區(qū)。

       在非常熱的腫瘤中，PC可以支配基質(zhì)室，取代癌相關(guān)的成纖維細(xì)胞和其他基質(zhì)成分（圖3d）。這在髓樣乳腺癌患者中得到了很好的說明，在髓樣乳腺癌患者中，致密的基質(zhì)PC可產(chǎn)生腫瘤反應(yīng)性抗體，并與異常有利的預(yù)后相關(guān)。

       6、上皮內(nèi)B細(xì)胞

       最后，可以發(fā)現(xiàn)表達(dá)CD19和CD20等標(biāo)記物的B細(xì)胞與T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞一起直接浸潤(rùn)腫瘤上皮（圖3b），這種模式對(duì)大多數(shù)癌癥的預(yù)后有利（圖1）。值得注意的是，上皮內(nèi)B細(xì)胞僅在一部分熱腫瘤中發(fā)現(xiàn)，這表明它們與T細(xì)胞相比具有獨(dú)特的進(jìn)入通路或其他要求。上皮內(nèi)B細(xì)胞的表型、克隆性、抗原特異性和功能尚不清楚，但可能很快通過空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)等方法揭示出來。

       TIL-B鄰域的形成與發(fā)展

       根據(jù)上述內(nèi)容，我們可以構(gòu)建一個(gè)工作模型，說明不同的TIL-B鄰域是如何產(chǎn)生和相互關(guān)聯(lián)的。

       TME中T細(xì)胞和髓樣細(xì)胞的存在似乎是任何形式TIL-Bs的先決條件，因?yàn)楹笳咴跊]有前者的情況下很少出現(xiàn)。事實(shí)上，已知功能失調(diào)或耗盡的T細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生CXCL13，它與其他因素一起可能會(huì)啟動(dòng)活化B細(xì)胞和次級(jí)淋巴器官中啟動(dòng)的PC的募集。這將導(dǎo)致簡(jiǎn)單的LMA可能進(jìn)化成為濾泡外反應(yīng)的位點(diǎn)，進(jìn)一步放大TIL-Bs和T細(xì)胞反應(yīng)。

       向原發(fā)性濾泡TLS形成的進(jìn)展可能需要允許的基質(zhì)和有利的細(xì)胞因子環(huán)境，而繼發(fā)性濾泡TLS的形成可能還需要諸如高抗原載量（包括新抗原、癌-睪丸抗原和病毒抗原）以及有利的體細(xì)胞突變譜等因素。生產(chǎn)性次級(jí)濾泡TLS可以通過產(chǎn)生長(zhǎng)壽的炎癥性PC來“增壓”TIL-B反應(yīng)，這些PC定植于腫瘤基質(zhì)并釋放針對(duì)腫瘤相關(guān)、組織特異性和/或自身抗原的親和力成熟抗體。

       反過來，強(qiáng)有力的局部抗體供應(yīng)將促進(jìn)ADCC、ADCP和其他效應(yīng)機(jī)制（稍后討論），從而產(chǎn)生與抗腫瘤效應(yīng)區(qū)相對(duì)應(yīng)的LMA。與此模型一致，最近的一項(xiàng)研究證明TLS確實(shí)促進(jìn)TME91中原位B細(xì)胞的成熟。應(yīng)用空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)和免疫組化方法對(duì)透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌進(jìn)行研究，結(jié)果表明，與TLS—腫瘤相比，TLS+腫瘤表現(xiàn)出更廣泛的B細(xì)胞表型多樣性，增加了體細(xì)胞超突變和克隆擴(kuò)增，漿細(xì)胞明顯浸潤(rùn)腫瘤基質(zhì)，IgG增強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞的涂層。

       三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)（TLS）由于與患者生存率和對(duì)傳統(tǒng)療法和免疫療法的反應(yīng)具有良好的相關(guān)性，近來受到了廣泛關(guān)注。然而，TLS、淋巴髓樣聚集物（LMA）和上皮內(nèi)B細(xì)胞往往同時(shí)存在，這突出了區(qū)分其獨(dú)立作用的重要性。

       在一項(xiàng)胰 腺癌研究中，只有組織成TLSs的B細(xì)胞才對(duì)預(yù)后有利。此外，在肺癌、黑色素瘤和胰 腺癌中，繼發(fā)性濾泡TLS比原發(fā)性濾泡TLS或LMA具有更強(qiáng)的預(yù)后影響。因此，在另一項(xiàng)黑色素瘤研究中，TLS含有較高比例的發(fā)生體細(xì)胞超突變的B細(xì)胞和較低比例的CD21+CD20+B細(xì)胞預(yù)后良好。

       同樣，在多種癌癥類型中，繼發(fā)性濾泡TLS比不太成熟的TLS、PD-L1表達(dá)或CD8+腫瘤浸潤(rùn)細(xì)胞（TIL）密度更好地預(yù)測(cè)PD-1–PD-L1阻斷的臨床反應(yīng)。繼發(fā)性卵泡TLS的顯著作用表明，親和力成熟、長(zhǎng)壽的PCs可能是最重要的預(yù)后和預(yù)測(cè)因素。

       然而，值得注意的是，在自身免疫和移植領(lǐng)域，繼發(fā)性卵泡TLS的重要性仍未得到解決。在狼瘡性腎炎中，累及B細(xì)胞和PC的LMA樣浸潤(rùn)很常見，與不良的腎 臟預(yù)后相關(guān)，而組織清晰的異位生發(fā)中心僅在少數(shù)（6%）患者中存在。此外，TLSs在長(zhǎng)期存活的心臟和腎 臟移植物中的存在，以及在許多TLSs中存在Treg細(xì)胞，表明了TLSs在移植中的耐受作用。

       考慮到TLS是免疫反應(yīng)開始而非完成的部位，人們可能會(huì)質(zhì)疑為什么在任何情況下，TLS本身都應(yīng)該是一個(gè)可靠的預(yù)后指標(biāo)。有人可能會(huì)預(yù)測(cè)，與“效應(yīng)區(qū)”相對(duì)應(yīng)的LMA一旦得到更好的定義和客觀測(cè)量，最終將代表最可靠的預(yù)后和預(yù)測(cè)指標(biāo)。

       TIL-B衍生抗體的靶點(diǎn)

       在過去25年中，癌癥患者血清抗體識(shí)別的抗原已通過SEREX、噬菌體展示和蛋白質(zhì)陣列等方法進(jìn)行了廣泛的研究，為理解TIL-B相關(guān)抗體反應(yīng)奠定了基礎(chǔ)。已顯示血清抗體可識(shí)別腫瘤相關(guān)蛋白，例如腫瘤蛋白 p53 和癌睪丸抗原 1B（CTAG1B；也稱為 NY-ESO-1）；來自移碼突變和內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒的多肽；和翻譯后修飾，例如異常糖基化粘蛋白 1 (MUC1)。

       盡管有這樣的例子，迄今為止確定的大多數(shù)血清抗體靶點(diǎn)都是未突變的自身蛋白，可以是核蛋白、細(xì)胞質(zhì)蛋白、跨膜蛋白或分泌蛋白6。此外，盡管各方共同努力識(shí)別特定癌癥所特有的血清學(xué)抗原，但迄今為止發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)抗原具有廣泛或普遍的表達(dá)模式，這表明它們產(chǎn)生于破壞的外周B細(xì)胞耐受機(jī)制，而不是傳統(tǒng)的適應(yīng)性免疫反應(yīng)。p53在這方面提供了信息，因?yàn)橐寻l(fā)現(xiàn)抗p53抗體主要識(shí)別野生型而非突變表位，再次表明自身反應(yīng)性B細(xì)胞的參與。

       截至目前，由TIL-B衍生抗體識(shí)別的抗原相對(duì)較少，因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)上，這需要從新鮮腫瘤中擴(kuò)增TIL-B并純化其分泌的抗體，或者從TIL-B中克隆抗體，并生產(chǎn)用于抗原發(fā)現(xiàn)的重組版本。迄今為止，僅鑒定出70種TIL-B靶抗原，主要來自乳腺、肺和卵巢腫瘤患者組織樣本。

       這些抗原跨越廣泛的細(xì)胞室（即細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外）和分子組成（例如核酸、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)），盡管迄今為止蛋白質(zhì)抗原的研究最多。許多對(duì)應(yīng)于已知的T細(xì)胞抗原，包括癌-睪丸抗原（NY-ESO-1、CT45、CT47）、分化抗原（黑色素瘤相關(guān)抗原家族成員和MLANA）、過度表達(dá)抗原（MUC1）和突變抗原（p53、乳腺癌2型易感蛋白（BRCA2））。

       其中一些與腫瘤發(fā)生有關(guān)（例如，p53、BRCA2、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）），而另一些廣泛或普遍表達(dá)，如熱休克和核糖體蛋白。在HPV誘導(dǎo)的頭頸癌中，TIL-B衍生抗體可識(shí)別病毒抗原（表1）。

       迄今為止，還沒有任何研究報(bào)道或設(shè)計(jì)用于檢測(cè)新抗原特異性TIL-B衍生抗體。因此，目前普遍的觀點(diǎn)是，TIL-B反應(yīng)主要涉及自身抗原，這可能反映了迄今為止在TIL-B抗原鑒定工作中主要使用野生型蛋白庫和陣列所產(chǎn)生的方法學(xué)偏差，新抗原誘發(fā)抗體反應(yīng)的傾向較低，和/或癌癥更容易破壞與B細(xì)胞相關(guān)的外周耐受機(jī)制（圖2b）。關(guān)于最后一點(diǎn)，最近發(fā)現(xiàn)TIL-B對(duì)自身蛋白基質(zhì)金屬蛋白酶14（MMP14）的反應(yīng)涉及種系編碼和體細(xì)胞超突變BCRs。

       值得注意的是，盡管血清和TIL-B抗體反應(yīng)涉及相似類別的抗原，但它們似乎是不耦合的。在卵巢癌中，抗p53和NY-ESO-1的自身抗體與CD20+TIL—Bs無關(guān)，即使在廣泛的腫瘤去瘤后仍持續(xù)存在，排除了腫瘤駐留的B細(xì)胞和PC是其主要來源。類似地，在乳腺癌中，TIL-B源性和血清源性自身抗體反應(yīng)在大多數(shù)抗原中是解耦的。

       這些觀察結(jié)果表明，血清抗體和TIL-B反應(yīng)可以獨(dú)立產(chǎn)生和持續(xù)。因此，可以想象，主要位于腫瘤引流淋巴結(jié)和骨髓而非TME的血清學(xué)反應(yīng)可能是抗腫瘤抗體的主要來源。

       TIL-Bs的治療手法

       很少有癌癥治療被設(shè)計(jì)成有意誘導(dǎo)TIL-B反應(yīng)；然而，我們對(duì)TIL-Bs使用的無數(shù)細(xì)胞和抗體機(jī)制的不斷理解提供了許多令人興奮的機(jī)會(huì)。下面，我們將概述最近的研究觀點(diǎn)和進(jìn)展。

       1 化療和靶向藥物

       基線TIL-B密度與人類和小鼠的化療反應(yīng)呈正相關(guān)。此外，化療可以進(jìn)一步增加TIL-B密度和共刺激分子的表達(dá)，以及誘導(dǎo)TLSs。值得注意的是，化療期間使用皮質(zhì)類固醇可能對(duì)TLSs的生發(fā)中心形成有害。

       與細(xì)胞毒 性化療相比，靶向藥物與TIL-Bs的相互作用可能不同，因?yàn)樵诤谏亓龌颊咧?，TIL-Bs與BRAF和MEK抑制劑的反應(yīng)呈負(fù)相關(guān)。STING激動(dòng)劑可促進(jìn)小鼠黑色素瘤模型中未成熟TLS的形成，并可能與誘導(dǎo)TLS成熟的藥物結(jié)合使用。

       最后，低劑量化療、溶瘤病毒和雙重檢查點(diǎn)阻斷的三重方案在乳腺癌小鼠模型中導(dǎo)致TIL-Bs增強(qiáng)和腫瘤消退增加。在這些早期研究的基礎(chǔ)上，有必要開展進(jìn)一步的工作，以確定使用化療和靶向藥物放大TIL-B反應(yīng)的最 佳策略。

       2 免疫檢查點(diǎn)封鎖

       據(jù)報(bào)道，PD-1+和PD-L1+TIL-Bs存在于多種人類癌癥中，初步表明TIL-Bs可能直接受PD-1和/或PD-L1靶向免疫檢查點(diǎn)阻斷的影響；CTLA4表達(dá)的類似數(shù)據(jù)尚未報(bào)道。

       大量證據(jù)表明，抗CTLA4和抗PD-1抗體阻斷劑對(duì)TIL-Bs和TLS具有強(qiáng)烈的積極作用，反映了上述途徑在調(diào)節(jié)B細(xì)胞、TFH細(xì)胞和濾泡Treg細(xì)胞之間的相互作用中所起的作用?；€TIL-B密度預(yù)測(cè)多發(fā)性癌癥患者對(duì)PD-1和CTLA4阻斷的反應(yīng)，并且確實(shí)被免疫檢查點(diǎn)阻斷增強(qiáng)。在使用新輔助抗PD-1抗體治療的非小細(xì)胞肺癌患者中，復(fù)發(fā)的腫瘤與密集的腫瘤免疫浸潤(rùn)相關(guān)，包括PCs和TLS的存在，而腫瘤中的非結(jié)構(gòu)性淋巴聚集與反應(yīng)無關(guān)。在尿路上皮癌患者中，腫瘤中存在基質(zhì)B細(xì)胞和不成熟的TLS與聯(lián)合抗CTLA4和抗PD-1抗體治療缺乏反應(yīng)有關(guān)，但治療后在有反應(yīng)的腫瘤中發(fā)現(xiàn)成熟的TLS ，表明TIL-B反應(yīng)發(fā)生了實(shí)質(zhì)性的、有利的轉(zhuǎn)化。

       臨床前模型為免疫檢查點(diǎn)阻斷對(duì)TIL-Bs和TLS的有利影響提供了直接的機(jī)制證據(jù)。在小鼠乳腺癌模型中，需要B細(xì)胞對(duì)CTLA4和PD-1阻斷產(chǎn)生反應(yīng)，并且在放射治療中添加抗PD-L1抗體將Breg細(xì)胞反應(yīng)轉(zhuǎn)化為與鱗狀細(xì)胞癌模型中腫瘤控制改善相關(guān)的效應(yīng)B細(xì)胞反應(yīng)。

       同樣，在小鼠黑色素瘤模型中，免疫檢查點(diǎn)阻斷導(dǎo)致TLS的定量和定性改善，并提高黑色素瘤模型的療效。最后，在肺癌模型中，抗 PD-1 抗體治療增加了 TLS 的數(shù)量和 TLS 產(chǎn)生的 IgG，同時(shí)改善了腫瘤控制。因此，免疫檢查點(diǎn)阻斷提供了一種強(qiáng)大的手段來增強(qiáng)癌癥中的 T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞反應(yīng)。

       3 激動(dòng)性抗CD40抗體

       激動(dòng)性抗CD40抗體正在對(duì)幾種癌癥進(jìn)行臨床評(píng)估，鑒于CD40在B細(xì)胞生物學(xué)中的中心作用，預(yù)計(jì)會(huì)強(qiáng)烈影響TIL-B反應(yīng)。事實(shí)上，在間皮瘤模型中，抗CD40抗體治療增強(qiáng)了TIL-B密度和B細(xì)胞依賴性腫瘤控制。在小鼠模型和癌癥患者中，抗CD40抗體治療導(dǎo)致循環(huán)B細(xì)胞水平急劇下降，同時(shí)增加共刺激分子的表達(dá)，這可能反映了激活誘導(dǎo)的血液滲出。在膠質(zhì)瘤模型中，抗CD40抗體治療誘導(dǎo)TLS和其他淋巴聚集，但這些與功能低下的T細(xì)胞、抑制性CD11b+B細(xì)胞和免疫檢查點(diǎn)阻斷反應(yīng)受損有關(guān)。因此，需要進(jìn)一步的研究來確定如何最好地調(diào)節(jié)CD40途徑以利于TIL-B反應(yīng)。

       4 細(xì)胞因子治療

       細(xì)胞因子如IL-2、IL-15和IL-21不僅支持T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的分化和增殖，還促進(jìn)B細(xì)胞的發(fā)育和同型轉(zhuǎn)換。事實(shí)上，在乳腺癌模型中，IL-21對(duì)于免疫檢查點(diǎn)治療的療效反應(yīng)是必需的。

       雖然IL-2通常用于刺激細(xì)胞溶解性T細(xì)胞，但它抑制TFH細(xì)胞分化并促進(jìn)Treg細(xì)胞反應(yīng)，因此可能對(duì)TIL-B反應(yīng)不利。其他可能用于促進(jìn)TIL-B反應(yīng)和TLS形成的細(xì)胞因子包括BAFF（一種B細(xì)胞成熟和存活因子）和CXCL13（一種B細(xì)胞化學(xué)引誘劑），這兩種細(xì)胞因子對(duì)人類癌癥的預(yù)后通常是有利的。

       然而，CXCL13也可以介導(dǎo)促腫瘤效應(yīng)。最后，通過與血管靶向肽的連接將TNFSF14靶向腫瘤血管的藥物誘導(dǎo)TLS的形成和正?；哪[瘤血管系統(tǒng)，從而增強(qiáng)T細(xì)胞浸潤(rùn)和與腫瘤疫 苗的治療協(xié)同作用。

       因此，細(xì)胞因子為促進(jìn)TIL-B反應(yīng)提供了幾種有希望的途徑，盡管與所有細(xì)胞因子療法一樣，挑戰(zhàn)是制定策略，特別增強(qiáng)抗腫瘤免疫，同時(shí)避免不必要的免疫效應(yīng)。

       5 疫 苗

       各種癌癥疫 苗已被證明可誘導(dǎo)患者TLS的形成，包括針對(duì)宮頸上皮內(nèi)瘤變中HPV抗原的異源DNA病毒疫 苗和胰 腺癌中基于異基因腫瘤細(xì)胞的疫 苗。此外，抗原負(fù)載的、CD40激活的B細(xì)胞正在作為基于細(xì)胞的疫 苗進(jìn)行研究，并被證明與黑色素瘤和淋巴瘤模型中的樹突狀細(xì)胞等效；這種方法通過腫瘤抗原特異性PCs182的共轉(zhuǎn)移進(jìn)一步增強(qiáng)。

       最近在對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤模型研究的過程中，用CD40激動(dòng)劑和IFNγ刺激的TNFSF9+（也稱為4-1BB配體，4-1BBL）B細(xì)胞與放射、CD8+T細(xì)胞和PD-L1阻斷相結(jié)合，與相同的負(fù)刺激B細(xì)胞組合相比，顯示出令人印象深刻的療效。到目前為止，還沒有關(guān)于B細(xì)胞或抗體對(duì)個(gè)性化新抗原靶向疫 苗的反應(yīng)的報(bào)告，但基于抗原呈遞和表位擴(kuò)散的已知機(jī)制，這些可能是可以預(yù)期的（圖4）。

       6 Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞耗竭

       鑒于Treg細(xì)胞在預(yù)防系統(tǒng)性自身抗體反應(yīng)中的重要作用，Treg細(xì)胞的去除是增強(qiáng)TIL-B反應(yīng)的一種引人注目的方法。事實(shí)上，在肺癌模型中，Treg細(xì)胞的缺失導(dǎo)致TLS的擴(kuò)張，從而支持T細(xì)胞增殖和樹突狀細(xì)胞功能的改善，從而導(dǎo)致腫瘤的破壞。盡管由于缺乏獨(dú)特的標(biāo)記物，Breg細(xì)胞的缺失具有挑戰(zhàn)性，但某些化療藥物和STAT3抑制劑、MEK188和BTK189可影響B(tài)reg細(xì)胞的分化和功能。此外，IL-10、IL-35、TGFβ和其他抑制因子的拮抗可能抑制Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞的活性。

       7 抗體相關(guān)療法

       最后，有幾種方法可以利用TIL-Bs的抗體介導(dǎo)效應(yīng)。

       像scRNA-seq這樣的轉(zhuǎn)化方法可以實(shí)現(xiàn)TIL-B衍生抗體的高通量克隆，因此目前的挑戰(zhàn)是確定哪些抗體和同源抗原最適合安全有效的治療靶向，正如最近所回顧的。一個(gè)重要的考慮因素是，一些抗體可能具有促腫瘤作用，并具有自身免疫后遺癥的風(fēng)險(xiǎn)。也就是說，高親和力、自身反應(yīng)性抗體不一定會(huì)誘發(fā)不可接受的免疫病理學(xué)，正如使用抗HIV-1的自身反應(yīng)性、廣泛中和性抗體所證明的那樣：一旦識(shí)別出具有適當(dāng)特異性的抗體，就可以進(jìn)一步改造或用于聯(lián)合治療，以增強(qiáng)所需的抗腫瘤性能。

       Heemsherk等人最近描述了一種雙特異性抗體，通過觸發(fā)中性粒細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒 性、ADCC和ADCP，在體內(nèi)誘導(dǎo)腫瘤消退，這與TIL-B效應(yīng)器機(jī)制特別相關(guān)。其他有希望的方法包括阻斷CD47促進(jìn)ADCP或阻斷CD55或CD46促進(jìn)補(bǔ)體介導(dǎo)的殺傷機(jī)制。

       總結(jié)

       現(xiàn)在的大量證據(jù)表明，TIL-Bs及其產(chǎn)生的抗體是人類癌癥免疫反應(yīng)的顯著特征。

       TIL-Bs與T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、髓樣細(xì)胞和其他細(xì)胞一起存在于“最熱”腫瘤的TME中，并顯示出活性抗原識(shí)別和多種效應(yīng)器功能的特征。它們?cè)谠S多適應(yīng)癥和治療方案中具有很強(qiáng)的預(yù)后和預(yù)測(cè)意義，包括CTLA4導(dǎo)向和PD-1導(dǎo)向的免疫檢查點(diǎn)抑制。

       此外，它們的數(shù)量和功能屬性可以通過標(biāo)準(zhǔn)治療、免疫檢查點(diǎn)抑制、治療性疫 苗和各種其他實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行調(diào)節(jié)。從二十年前的開創(chuàng)性研究開始，TIL-Bs的靶抗原正在被闡明。迄今為止，揭示了具有不同程度腫瘤特異性特征的自身蛋白的優(yōu)勢(shì)。在這方面和其他方面，TIL-Bs與介導(dǎo)自身免疫反應(yīng)的致病性B細(xì)胞和PC有許多共同特征。如果TIL-B特異性確實(shí)偏向于自身反應(yīng)性，那么我們可以設(shè)想這將為免疫系統(tǒng)提供一種有效的手段，通過識(shí)別腫瘤系統(tǒng)發(fā)育中具有更多“軀干”表達(dá)模式的非突變抗原來應(yīng)對(duì)腫瘤內(nèi)異質(zhì)性。

       在過去幾年中，TIL-B領(lǐng)域受到了廣泛關(guān)注，但面臨著許多新挑戰(zhàn)：大多數(shù)TIL-B效應(yīng)器的功能取決于其同源抗原的性質(zhì)；例如，ADCC需要表面抗原，而信號(hào)干擾需要驅(qū)動(dòng)腫瘤細(xì)胞適應(yīng)性的抗原。

       因此，為了充分了解TIL-Bs的作用機(jī)制，我們需要對(duì)其抗原圖譜有一個(gè)更廣泛、無偏見的觀點(diǎn)，這將需要使用多種正交發(fā)現(xiàn)方法。

       scRNA-seq首次將TIL-B克隆型映射到表型，開創(chuàng)了一個(gè)新時(shí)代，即從感興趣的TIL-B表型中產(chǎn)生重組抗體，并用于以前所未有的規(guī)模探測(cè)抗原特異性和效應(yīng)機(jī)制。

       同時(shí)，我們需要破譯和更精確地描述發(fā)現(xiàn)TIL-B的各種細(xì)胞鄰域，超越TLS，包括通過多種免疫組織學(xué)方法揭示的其他結(jié)構(gòu)。為此，具有匹配BCR和TCR測(cè)序數(shù)據(jù)的空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)有望實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。

       最后，我們需要利用來自上述努力的見解來設(shè)計(jì)新一代免疫療法，旨在利用TIL-B效應(yīng)器機(jī)制與T細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞協(xié)同作用。再一次，自身免疫領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的、多功能的、組織受限的和不可抑制的免疫反應(yīng)的豐富例子，這些免疫反應(yīng)針對(duì)許多同樣的外周組織，這些組織將我們視為惡性腫瘤。為了開發(fā)下一代免疫療法，迫切需要新的臨床前模型來概括TIL-Bs所處的復(fù)雜細(xì)胞環(huán)境。

       參考文獻(xiàn)

       Tumour-infiltrating B cells: immunological mechanisms, clinical impact and therapeutic opportunities. Nat Rev Cancer 22, 414–430 (2022)