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尿激酶提取方法是什么?

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來源:CPhI制藥在線
  2019-10-25
尿激酶提取方法是什么?下面就來講一下簡單的步驟。

       尿激酶提取工藝為:

尿激酶提取方法是什么?

       新鮮尿液--除雜--處理尿液--硅膠吸附--吸附物進行鹽析--清洗--洗滌--洗脫--硫酸沉淀--虹吸抽干的粗品

       提取的操作步驟有:

       1.收集新鮮的尿液過濾,除去雜物,轉(zhuǎn)入攪拌池中,關(guān)上排水閥。

       2.攪拌池中的尿液加入硅膠,勻速且向一個方向攪拌2.5至3小時。(每50公斤加硅膠1公斤,加入的硅膠為中性的,預先處理好的)

       3.攪拌好后打開排水閥,池中的尿液與硅膠一同由排水閥流出,這時預先要在排水閥上安裝一個網(wǎng)狀的布袋,使廢棄的尿液由下水道排出,硅膠則被收集起來。

       4.收集好的硅膠放入層析柱中,先用自來水來清洗,不控制其流速,待其廢液的顏色與水的一樣清時即可,若清洗許久都不清時可加入少量的氨水來調(diào)節(jié)。

       5.清洗完畢后,調(diào)節(jié)層析柱的流速為800ml每分鐘,用洗脫水(氨水120ml,尿激酶活性提高劑120g),進行洗脫.(此時要注意加入洗脫水時要確保柱體為一半偏上即可)

       6.待上述液體全部流過后,從新調(diào)節(jié)層析柱的流速為600ml每分鐘,加入解脫水(氯化銨3公斤,尿激酶活性提高劑60g至80g)進行洗脫,大約5至10分鐘后,加入氨水7500ml至8000ml,將其洗脫液收集到一容器內(nèi)。

       7.在上步收集的液體中加入凈化的飽和硫酸銨,攪拌均勻后,靜置8小時使其沉淀。

       8.將沉淀轉(zhuǎn)入抽濾瓶內(nèi),虹吸抽干后,用小鐵鏟鏟起,收集得到其粗品。

       

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