精準(zhǔn)治療時代生物標(biāo)志物助力腫瘤個體化診療

       精準(zhǔn)醫(yī)療，是讓臨床醫(yī)生根據(jù)患者的疾病特點選擇個性化的診療方案。腫瘤在不同的時期，不同的階段，基因的變化、臨床的表現(xiàn)等均會影響治療方案的選擇。2019年ASCO年會期間，Clinical Care Options（CCO）的生物標(biāo)志物專場對目前應(yīng)用較多的生物標(biāo)志物進(jìn)行了詳細(xì)的介紹與解讀。

       實體瘤的dMMR和MSI檢測

       實體瘤進(jìn)行dMMR和MSI檢測，主要源于帕博利珠單抗跨瘤種獲批治療dMMR或MSI-H實體瘤，常見瘤種中帕博利珠單抗單藥有效率，而且MSI狀態(tài)對II期結(jié)直腸癌有預(yù)后作用并可用于判斷氟脲嘧啶類藥物治療是否獲益。目前臨床上可及的MSI檢測手段主要有二大類，第一類是免疫組化方法（IHC）檢測MLH1、PMS2、MSH6和MSH2蛋白，如果四種蛋白均有表達(dá)，認(rèn)為是非dMMR或非MSI-H狀態(tài)，如果有蛋白表達(dá)缺失，應(yīng)做基因檢測進(jìn)一步確認(rèn)，這是因為IHC的4種蛋白表達(dá)缺失與相關(guān)基因改變并不總是平行，可能的原因包括基因啟動子甲基化、蛋白降解以及基因突變未影響蛋白表達(dá)。第二類是通過測序方法測定微衛(wèi)星長度并與正常對照相比較以確定MSI狀態(tài)，存在MSI-H時應(yīng)明確為體突變還是胚系突變所致，MSI-H 在不同瘤種的發(fā)生頻度。

       通常MSI-H腫瘤的腫瘤突變負(fù)荷（TMB）明顯增加，是非MSI-H腫瘤的10～100倍，其中MSH2/MSH蛋白表達(dá)缺失時TMB增加水平更顯著，MSI-H結(jié)直腸癌的TMB較其他實體瘤的TMB增加更明顯。如上所述，dMMR和MSI檢測已是臨床常規(guī)，二種檢測方法互為補充可以避免漏診；不同部位MSI-H腫瘤的基因組改變不盡相同，MSI-H結(jié)直腸癌的TMB增加尤其顯著，部分解釋了免疫檢查點抑制劑療效反應(yīng)的不同。

       PD-L1檢測與治療

       腫瘤微環(huán)境中腫瘤細(xì)胞主要通過表達(dá)PD-L1，與活化的T淋巴細(xì)胞表面的PD-1結(jié)合后，失活T淋巴細(xì)胞功能，從而使腫瘤逃避機體的免疫監(jiān)視與殺傷功能。2014ASCO有研究公布了不同瘤種的PD-L1表達(dá)與免疫治療ORR的數(shù)據(jù)，提示PD-L1表達(dá)與免疫治療ORR在一定程度上正相關(guān)，因此評估PD-L1表達(dá)程度對預(yù)判免疫治療療效就顯得至關(guān)重要。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，PD-L1不僅表達(dá)于腫瘤細(xì)胞表面，還可表達(dá)于腫瘤浸潤免疫細(xì)胞表面，所以目前有關(guān)PD-L1表達(dá)的評分共有3種，分別是TPS（tumor proportion score）、TC（tumor cell）與IC(immune cell)和CPS（combined positive score）。

       現(xiàn)有的各個免疫檢查點抑制劑療效預(yù)估時，PD-L1表達(dá)的評判采用不同的分析方法和解釋標(biāo)準(zhǔn)，造成了一藥一標(biāo)準(zhǔn)的復(fù)雜現(xiàn)狀，極不利于臨床實踐工作，因此開展了BLUEPRINT PD-L1 IHC Assay Comparison Project，嘗試確定統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)以方便臨床工作。此外另有研究探討了非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）接受過放療、化療以及TKI治療是否會對PD-L1表達(dá)產(chǎn)生影響，結(jié)果顯示70%左右的患者治療前后PD-L1表達(dá)并無顯著變化。截至2019年5月26日，共有6種抗PD1/PDL1抗體獲批47個治療適應(yīng)癥，其中帕博利珠單抗和阿替利珠單抗在治療NSCLC、尿路上皮癌、胃/胃食管交界癌、宮頸癌和三陰性乳腺癌時需要檢測PD-L1表達(dá)。

       BRCA1和BRCA2突變

       各種內(nèi)外因素都可導(dǎo)致DNA損害，細(xì)胞則通過各種系統(tǒng)修復(fù)受損DNA，維持基因組穩(wěn)定，此系統(tǒng)就稱為DNA損傷反應(yīng)（DDR）。PARP是很關(guān)鍵的DNA修復(fù)酶，常在癌細(xì)胞中過度表達(dá)，使得癌細(xì)胞對放化療治療耐藥，PARP抑制劑治療腫瘤就是通過抑制DNA修復(fù)最終導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡。BRCA1/2主要通過同源重組對受損的雙鏈DNA進(jìn)行修復(fù)，當(dāng)其有缺陷時，細(xì)胞對PARP抑制特別敏感，發(fā)生死亡，圖6顯示的是不同瘤種中同源重組DNA損害修復(fù)基因突變的發(fā)生率。

       目前已有多項研究證實PARP抑制劑對于BRCA1/2突變的進(jìn)展期卵巢癌和乳腺癌有著很好的治療作用。近期研究表明，PARP抑制劑對鉑敏感的進(jìn)展期胰 腺癌也有很好的治療作用，2019ASCO報告的III期POLO研究顯示，BRCA1/2突變進(jìn)展期胰 腺癌一線含鉑治療后無進(jìn)展者給予奧拉帕利維持治療可以明顯延長患者無進(jìn)展生存。事實上DDR過程中，遠(yuǎn)不止BRCA1/2基因的改變參與腫瘤的發(fā)生，因此有關(guān)DDR抑制劑的研發(fā)十分火熱，如ATR抑制劑、Wee1抑制劑等，初步研究顯示對于PARP抑制劑耐藥的BRCA突變腫瘤有治療活性。

       轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌（mCRC）的BRAF和HER2突變

       對于mCRC患者，一線如果將抗EGFR治療作為優(yōu)選，患者需同時具備如下條件：無RAS和BRAFV600E突變及HER2擴增，且同時位于左半結(jié)腸。顯示了mCRC中常見的基因組改變及發(fā)生頻率，其中BRAF是KRAS途徑的下游基因， BRAFV600E突變發(fā)生頻率約為8%，非BRAFV600E突變發(fā)生頻率約為2%，大量研究表明BRAFV600E突變是mCRC的不良預(yù)后因素。目前NCCN指南推薦BRAFV600E抑制劑單藥 化療藥物 抗EGFR單抗或是BRAFV600E抑制劑組合 抗EGFR單抗≥2線治療BRAFV600E突變mCRC。mCRC中BRAF還存在大量非V600突變，有研究顯示這類突變患者的生存不但優(yōu)于BRAFV600E患者，甚至還優(yōu)于BRAF野生型的mCRC。

       HER2擴增指導(dǎo)的治療在乳腺癌和進(jìn)展期胃癌中廣泛應(yīng)用，目前已有5種靶向HER2的治療藥物。HERACLES研究顯示，CRC中HER2擴增發(fā)生率為5.3%，多發(fā)生于KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA野生型腫瘤中，HER2擴增mCRC對抗EGFR治療耐藥，但卻能獲益于抗HER2治療。HERACLES研究中采用曲妥珠單抗聯(lián)合拉帕替尼治療難治性KRAS WT/HER2 mCRC，疾病控制率達(dá)59%；MyPathway研究中采用曲妥珠單抗 帕妥珠單抗治療HER2 mCRC ，治療反應(yīng)率32%。因此HER2擴增檢測在mCRC中非常重要，是指導(dǎo)治療選擇、預(yù)測治療療效的重要依據(jù)。

       NTRK融合、ROS1重排、FGFR改變、RET活化及其他標(biāo)記物

       神經(jīng)營養(yǎng)因子受體酪氨酸激酶基因NTRK1、NTRK2和NTRK3分別編碼TRKA、TRKB和TRKC蛋白，三者均為酪氨酸激酶，統(tǒng)稱為TRK家族蛋白。多種腫瘤中都有TRK融合，目前針對TRK的抑制劑共有3種，分別為larotrectinib、entrectinib和LOXO-195，entrectinib還適用于ROS1 NSCLC。

       ROS1重排大約發(fā)生于1%～2%的NSCLC，導(dǎo)致ROS1激酶區(qū)域的結(jié)構(gòu)性活化，驅(qū)動腫瘤發(fā)生。目前針對ROS1的靶向藥物有entrectinib、克唑替尼和Lorlatinib，后二者同時也適用于ALK融合陽性的NSCLC。

       FGFR也是一種較為常見的與惡性腫瘤相關(guān)的基因改變，在各個瘤種中的發(fā)生頻度，目前獲批的FGFR抑制劑有erdafinitib，主要治療FGFR2和FGFR3突變的晚期膀胱癌。

       融合和突變二種方式都可以活化RET基因，針對RET改變的治療用藥包括LOXO-292和BLU-667，前者被FDA授予突破性的治療設(shè)計。

       目前極有可能成為新的腫瘤治療標(biāo)記物的還有PIK3CA、PDGFR α/KIT、MET和KRAS基因改變，針對PIK3CA的藥物有alpelisib，已獲FDA批準(zhǔn)治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌，avapritinib在PDGFRα或KIT驅(qū)動發(fā)生的胃腸道基質(zhì)瘤中顯示了治療活性，克唑替尼對MET擴增或突變產(chǎn)生的致癌活性也有抑制作用，新藥KRASG12C也顯示了對KRAS信號的下調(diào)作用。

       總結(jié)

       腫瘤的內(nèi)科治療發(fā)展已有100余年，由最初一刀切的化療發(fā)展到現(xiàn)今化療、靶向治療、免疫治療等多種治療手段，進(jìn)步不可謂不大，而且隨著檢測手段的不斷進(jìn)步，腫瘤的分類也越來越精細(xì)，因此腫瘤診療走向真正的個體化、精準(zhǔn)化不再只是一句口號，而是正在逐步發(fā)展的一個事實。這場專題主要介紹了目前臨床應(yīng)用最為廣泛、研究最為火熱的可用于指導(dǎo)臨床治療實踐的相關(guān)生物標(biāo)記物以及已經(jīng)獲批或有研究證實具有治療活性的針對上述標(biāo)記物可選用的藥物。個體化精準(zhǔn)治療是現(xiàn)在和未來腫瘤治療的發(fā)展方向 ，因此尋找發(fā)現(xiàn)相關(guān)標(biāo)記物并推動相關(guān)藥物的研發(fā)是未來腫瘤研究領(lǐng)域的重點。