細(xì)胞療法的下一個(gè)前沿陣地：可“現(xiàn)成”使用的CAR-T

      就在一年半以前，美國FDA批準(zhǔn)了兩款革命性的CAR-T細(xì)胞療法：諾華公司的Kymriah和吉利德公司的Yescarta。

       兩款產(chǎn)品都是自體療法，這意味著它們是患者特異性的。其制備和治療過程為：從患者血液中分離出T細(xì)胞，保存并運(yùn)送給制造商，利用基因工程技術(shù)對患者T細(xì)胞進(jìn)行基因修飾，使其表達(dá)一種嵌合抗原受體（CAR），修飾后的T細(xì)胞回輸患者，識別和攻擊患者癌細(xì)胞，從而達(dá)到治療癌癥的目的。雖然這種個(gè)性化治療正在徹底改變癌癥治療和醫(yī)療保健，但它也存在著一些明顯的局限性。

      當(dāng)前自體CAR-T療法的局限性

      因?yàn)樽泽wCAR-T是患者特異性的，所以每種治療只能用于一個(gè)患者；如果患者B接受了患者A的治療，那么患者A的CAR-T細(xì)胞就會攻擊患者B的所有細(xì)胞（而不僅僅是癌細(xì)胞），將它們識別為“外來的”。

      這種患者特異性的治療特點(diǎn)也意味著勞動密集型工作以及增加的產(chǎn)品生產(chǎn)時(shí)間（通常需要3-4周的時(shí)間來生產(chǎn)），同時(shí)也與癌癥治療爭分奪秒的理念背道而馳。雖然幾周的時(shí)間聽上去不像想象中的那么長，但它比許多非個(gè)性化治療要長，而多數(shù)治療是幾乎可以立即提供給患者的。

      個(gè)性化T細(xì)胞的勞動密集型工作也極大地推高了產(chǎn)品的價(jià)格——在美國市場，Kymriah一次性治療的價(jià)格標(biāo)簽為47.5萬美元，Yescarta為7.3萬美元。

      為了解決這些問題，有多家研究機(jī)構(gòu)和制藥公司正在推動下一代CAR-T療法——同種或“現(xiàn)成（off-the-shelf）”療法的開發(fā)，這類療法可以由健康捐贈者的細(xì)胞批量生產(chǎn)，并用于多個(gè)患者。

      “現(xiàn)成”CAR-T療法的研究進(jìn)展

      來自加州大學(xué)洛杉磯分校（UCLA）的研究人員能夠通過人工胸腺類器官將多能干細(xì)胞（幾乎可以轉(zhuǎn)變成任何細(xì)胞類型）轉(zhuǎn)化為T細(xì)胞。這些類器官（源自干細(xì)胞的三維器官的微型簡化版）模擬了胸腺，這是人體內(nèi)將造血干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為T細(xì)胞的器官。

      2019年1月份發(fā)表在《Cell Stem Cell》上的研究中，研究人員證明了人工胸腺類器官的三維環(huán)境可以使T細(xì)胞成功成熟。重要的是，他們從用于研究的兩種多能干細(xì)胞中創(chuàng)造出了成熟的T細(xì)胞：人類胚胎干細(xì)胞（來自捐獻(xiàn)的移植前人類胚胎）和誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞（IPSC，來自健康成人供體組織如皮膚或血細(xì)胞重新編程）。

      這項(xiàng)研究的通訊作者、UCLA瓊森綜合癌癥中心癌癥和干細(xì)胞生物學(xué)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人Gay Crooks在一份新聞稿中表示，“令人興奮的是，我們能夠從多功能干細(xì)胞創(chuàng)造出成熟T細(xì)胞。我對這項(xiàng)技術(shù)未來的希望是，我們可以將其與基因編輯工具結(jié)合起來，創(chuàng)造出更容易使患者獲取的‘現(xiàn)成’T細(xì)胞療法。”

      研究人員表明，他們可以通過基因工程使多能干細(xì)胞表達(dá)一種特定的癌癥靶向T細(xì)胞受體，從而創(chuàng)造出能夠靶向和殺死小鼠腫瘤的T細(xì)胞。

      該研究的第一作者、Crooks的實(shí)驗(yàn)室助理項(xiàng)目科學(xué)家Amelie Montel Hagen表示，“一旦我們創(chuàng)造了基因編輯的多功能干細(xì)胞系，可以在人造胸腺器官中產(chǎn)生腫瘤特異性T細(xì)胞，那么我們就可以無限期地?cái)U(kuò)大這些干細(xì)胞系。”

      盡管這項(xiàng)技術(shù)很有前途，但仍有一些問題需要解決。人工胸腺類器官產(chǎn)生的T細(xì)胞仍然表達(dá)表面分子，不符合每個(gè)患者，導(dǎo)致患者排斥這些T細(xì)胞。

      該研究的另一位共同第一作者、UCLA血液科臨床指導(dǎo)員Christopher Seet表示，“我們的下一步將是創(chuàng)造一種T細(xì)胞，這種T細(xì)胞具有對抗癌癥的受體，但不具有導(dǎo)致細(xì)胞排斥的分子，這將是開發(fā)‘通用型’T細(xì)胞療法的一個(gè)重要步驟。”

      2016年7月，他們的人工胸腺類器官技術(shù)被授權(quán)給了吉利德旗下凱特制藥（Kite Pharma）。2017年4月，他們首次在《Nature Methods》上發(fā)表了其技術(shù)，證明人工胸腺類器官允許成人造血干細(xì)胞成熟為T細(xì)胞。目前，凱特制藥還沒有發(fā)布關(guān)于他們使用類器官技術(shù)的任何進(jìn)一步更新。

      生物制藥領(lǐng)域的“現(xiàn)成”CAR-T療法研發(fā)現(xiàn)狀

      目前，“現(xiàn)成”療法也是生物技術(shù)領(lǐng)域的熱門話題，多家公司正致力于下一個(gè)突破性療法，包括UCLA/凱特制藥的人工胸腺類器官技術(shù)。此外，Cellectis公司也在研究基因編輯（使用TALEN技術(shù)）和同種異體CAR-T療法（也稱為通用型CAR-T細(xì)胞療法，UCART））。

      該公司正在開發(fā)一系列的UCART。目前，以急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）中的CD123+白血病細(xì)胞為靶點(diǎn)的UCART123，正在兩項(xiàng)開放標(biāo)簽I期研究中進(jìn)行評估：AML123研究評估治療156名AML患者的有效性和安全性；ABC123研究評估治療72例母細(xì)胞性漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞腫瘤（BPDCN）患者的有效性和安全性。UCART22旨在開發(fā)治療CD22+B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血?。˙-ALL）和CD22+B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（NHL），目前該療法正在一項(xiàng)開放標(biāo)簽、劑量遞增I期研究中，評估治療復(fù)發(fā)或難治性CD22+B-ALL患者的有效性和安全性。UCARTCS1正被開發(fā)用于治療表達(dá)CS1的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，如多發(fā)性骨髓瘤（MM）。UCARTCLL1處于臨床前開發(fā)，用于治療表達(dá)CLL1的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，如AML。

      此外，Cellectis還與另一家以CAR-T為重點(diǎn)的生物技術(shù)公司Allogene Therapeutics合作開發(fā)異基因CAR-T療法。后者的ALLO-501靶向CD19，目前正在開發(fā)用于治療復(fù)發(fā)或難治性NHL。2019年1月，美國FDA批準(zhǔn)了該藥的研究性新藥申請（IND），I期臨床試驗(yàn)預(yù)計(jì)將在接下來的幾個(gè)月內(nèi)啟動。Cellectis還將2種療法授權(quán)給了Allogene：以B細(xì)胞成熟抗原（BCMA）為靶點(diǎn)的ALLO-715，治療復(fù)發(fā)或難治性MM；以CD135（也稱為FLT3）為靶點(diǎn)的ALLO-819，治療復(fù)發(fā)或難治性AML。

      Allogene與Cellectis和輝瑞合作，已啟動了3項(xiàng)開放標(biāo)簽、單臂I期研究，評估同種異體CAR-T療法UCART19治療復(fù)發(fā)或難治性CD19+B-All患者：PALL研究涉及18例兒童患者；CALM研究是一個(gè)劑量遞增研究，涉及40例成人患者；另一項(xiàng)長期安全性和療效隨訪研究涉及200例晚期淋巴惡性腫瘤患者。

      Allogene于2018年12月在美國血液學(xué)學(xué)會（ASH）會議上報(bào)告了一些令人振奮的概念驗(yàn)證結(jié)果。在接受UCART19、氟達(dá)拉濱/環(huán)磷酰胺和抗CD52單克隆抗體治療的17名患者中，14名患者（82%）獲得完全緩解，UCART19細(xì)胞顯著擴(kuò)增。與此形成鮮明對比的是，僅接受UCART19和氟達(dá)拉濱/環(huán)磷酰胺（無抗CD52抗體）治療的4名患者沒有反應(yīng)，UCART19的擴(kuò)增最小。這突出了抗CD52抗體對同種異體CAR-T療法療效的明顯重要性。安全性數(shù)據(jù)看起來也比較有希望：沒有3級或4級神經(jīng)**病例，只有2例1級移植物抗宿主?。?0%），3例3級或4級細(xì)胞因子釋放綜合征“一般可控制”（14%），5例3級或4級病毒感染（24%），6例4級長時(shí)間細(xì)胞減少癥（29%）。

      盡管這種同種異體CAR-T技術(shù)仍在開發(fā)中，但對其關(guān)注點(diǎn)已經(jīng)放在了其生產(chǎn)效率上，以及與自體CAR-T療法的生產(chǎn)效率進(jìn)行對比。例如，Allogene指出每批同種異體CAR-T細(xì)胞療法有可能治療100名患者。這與目前已上市的兩款CAR-T細(xì)胞療法相比具有顯著的優(yōu)勢。

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