Nature深度：CAR-T療法想要騰飛 這個(gè)問題一定要解決

       AR-T細(xì)胞療法是治療癌癥的革命性療法之一。它通過基因工程改造患者自身的T細(xì)胞，讓它們成為攻擊癌癥的細(xì)胞武器。靶向CD19抗原的兩款獲批CAR-T療法（諾華的Kymriah和Kite Pharma的Yescarta）在治療B細(xì)胞急性淋巴性白血病（ALL）和彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）方面表現(xiàn)出出色的療效。而且在全球超過100項(xiàng)正在進(jìn)行的臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，靶向其它靶點(diǎn)的CAR-T療法也可以獲得較高的緩解率。

       然而，隨著更多的患者接受CAR-T療法的治療，而且更長(zhǎng)隨訪數(shù)據(jù)開始出現(xiàn)，業(yè)界發(fā)現(xiàn)大約30-50%接受抗CD19的CAR-T療法的患者在達(dá)到緩解之后癌癥會(huì)再度復(fù)發(fā)，大多數(shù)復(fù)發(fā)出現(xiàn)在接受治療后一年內(nèi)。復(fù)發(fā)并不局限于靶向CD19的療法，靶向其它靶點(diǎn)的CAR-T療法在臨床試驗(yàn)中也面臨患者復(fù)發(fā)的挑戰(zhàn)。而且10-20%接受抗CD19的CAR-T療法的患者最初就無法進(jìn)入緩解期，CAR-T療法在治療B細(xì)胞白血病和淋巴瘤之外癌癥類型的表現(xiàn)也不盡如人意。

       隨著CAR-T療法的應(yīng)用不斷擴(kuò)展，理解CAR-T療法的局限并克服這些障礙，對(duì)發(fā)掘CAR-T療法的全部潛能至關(guān)重要。日前，《Nature Reviews Clinical Oncology》上發(fā)表的一篇綜述盤點(diǎn)了限制CAR-T療法長(zhǎng)期緩解疾病的種種障礙，作者同時(shí)對(duì)克服這些局限性的潛在策略和研究進(jìn)行了總結(jié)。今天藥明康德微信團(tuán)隊(duì)將與讀者分享這篇綜述的精彩內(nèi)容。

       障礙1：無法進(jìn)入緩解期

       患者想要從CAR-T療法中獲益的先決條件是他們體內(nèi)的T細(xì)胞能夠成功生產(chǎn)出CAR-T療法，而且接受治療之后能夠產(chǎn)生細(xì)胞**反應(yīng)，理想情況下進(jìn)入完全緩解。然而，有些患者無法滿足這些先決條件……

       CAR-T療法的一個(gè)特點(diǎn)是療法制造過程復(fù)雜，需要從患者體內(nèi)收集足夠數(shù)量的T細(xì)胞，并且及時(shí)完成基因工程對(duì)T細(xì)胞的改造和T細(xì)胞的擴(kuò)增和純化。這些復(fù)雜過程中的每一步都有可以改進(jìn)的空間。例如，在某些患者中，由于接受前期化療，或者本身疾病癥狀嚴(yán)重，導(dǎo)致無法收集到足夠的T細(xì)胞制造CAR-T療法。目前幾乎所有CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品都會(huì)使用CD4+ T細(xì)胞和CD8+ T細(xì)胞，然而CD4+和CD8+ T細(xì)胞之間的比例在每個(gè)患者之間相差甚遠(yuǎn)，這可能影響CAR-T產(chǎn)品的療效。

       CAR-T產(chǎn)品中的其它細(xì)胞成分也可能影響產(chǎn)品的療效，近期的一個(gè)案例是在對(duì)T細(xì)胞進(jìn)行CAR轉(zhuǎn)染時(shí)，由于T細(xì)胞中混入了B細(xì)胞的雜質(zhì)，導(dǎo)致患者對(duì)CAR-T療法產(chǎn)生抗性（學(xué)術(shù)經(jīng)緯相關(guān)閱讀：關(guān)注！Nature子刊揭示CAR-T潛在風(fēng)險(xiǎn)，生產(chǎn)制造需謹(jǐn)慎）。這一案例凸顯出起始細(xì)胞純度的重要性。美國(guó)國(guó)家癌癥中心（NCI）的研究表明，通過使用磁珠技術(shù)正向選擇CD4+和CD8+ T細(xì)胞，提高起始T細(xì)胞的純度，可以提高CAR-T產(chǎn)品的效力。

       從健康供體中獲得T細(xì)胞來生產(chǎn)同種異體CAR-T細(xì)胞也是解決CAR-T細(xì)胞質(zhì)量問題的一個(gè)潛在方法。多家公司已經(jīng)開始研發(fā)這類“即用型”CAR-T療法。這類療法的優(yōu)點(diǎn)在于產(chǎn)品可以被所有患者即時(shí)使用，并且能夠克服患者自身T細(xì)胞不足或者CAR-T療法質(zhì)量不高的缺陷。這些療法仍然需要對(duì)CAR-T產(chǎn)品進(jìn)行更多的基因工程改造來限制免疫排斥反應(yīng)和移植物抗宿主病（GVHD）。另一種增強(qiáng)CAR-T療法效果的策略是使用將CAR表達(dá)在天然殺傷（NK）細(xì)胞上。

       障礙2：癌癥復(fù)發(fā)

       在接受抗CD19和抗CD22的CAR-T細(xì)胞療法的前體B細(xì)胞ALL患者中，在接受治療后12個(gè)月內(nèi)，可能高達(dá)50%的患者的癌癥會(huì)復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)通常分為兩類：抗原陽性的腫瘤細(xì)胞早期復(fù)發(fā)，和抗原丟失的腫瘤細(xì)胞晚期復(fù)發(fā)。對(duì)CAR-T細(xì)胞持久性和癌癥對(duì)CAR-T療法產(chǎn)生抗性的更深入的理解，對(duì)優(yōu)化CAR-T療法非常關(guān)鍵。

       抗原陽性復(fù)發(fā)

       早期ALL復(fù)發(fā)通常出現(xiàn)在緩解之后的最初幾個(gè)月，這通常是由于CAR-T細(xì)胞持久性有限和/或B細(xì)胞發(fā)育不全。這意味著活躍CAR-T細(xì)胞帶來的對(duì)白血病細(xì)胞的監(jiān)察功能的喪失。影響CAR-T細(xì)胞持久性的因素很多。除了T細(xì)胞自身質(zhì)量和最初的T細(xì)胞表型以外，CAR使用的共刺激蛋白域也非常關(guān)鍵。臨床前和臨床研究顯示，攜帶CD28共刺激蛋白域的CAR-T細(xì)胞持久性通常不如攜帶4-1BB共刺激蛋白域的CAR-T細(xì)胞。例如，有研究表明基于4-1BB的CAR-T細(xì)胞在血液中的中位持續(xù)時(shí)間為168天，而基于CD28的CAR-T細(xì)胞只有約30天。因此，改善CAR-T細(xì)胞持久性的努力將基于對(duì)與CAR-T細(xì)胞功能相關(guān)的T細(xì)胞生物學(xué)的進(jìn)一步了解和基于這些洞見對(duì)CAR-T細(xì)胞設(shè)計(jì)的改良。

       除此之外，其它改良CAR-T細(xì)胞持久性的方法包括：在患者達(dá)到緩解之后，定期輸入T細(xì)胞抗原呈現(xiàn)細(xì)胞來激活CAR-T細(xì)胞，以此達(dá)到重新激活和擴(kuò)展CAR-T細(xì)胞群體的作用。這一策略的優(yōu)點(diǎn)在于它可能提供一種通用的機(jī)制來增強(qiáng)CAR-T療法的效果。

       將CAR-T細(xì)胞療法與免疫檢查點(diǎn)抑制劑或其它免疫調(diào)節(jié)療法聯(lián)用，可能提供協(xié)同效應(yīng)來優(yōu)化臨床反應(yīng)的速度、深度和持續(xù)性。臨床前研究表明阻斷PD-1/PD-L1信號(hào)通路可能改善CAR-T細(xì)胞療法的效力。目前也有多項(xiàng)臨床試驗(yàn)在檢測(cè)這兩種免疫療法聯(lián)用的效果。

       抗原丟失或調(diào)節(jié)介導(dǎo)的免疫逃逸

       抗原調(diào)節(jié)是在CAR-T療法成功導(dǎo)致疾病緩解后癌癥再度復(fù)發(fā)的最清晰機(jī)制之一。它不但在接受CAR-T療法的患者中出現(xiàn)，而且出現(xiàn)在接受單克隆抗體和雙特異性T細(xì)胞接合器治療的患者中。目前已經(jīng)確認(rèn)的導(dǎo)致CD19表達(dá)喪失的機(jī)制包括RNA剪接改變，導(dǎo)致生成的CD19的靶向表位出現(xiàn)變化，或者細(xì)胞表面表達(dá)減弱，和擾亂CD19向細(xì)胞表面的運(yùn)輸。已有研究表明，腫瘤細(xì)胞不需要完全丟失抗原就可以對(duì)CAR-T細(xì)胞療法產(chǎn)生抗性。

       由于抗原丟失或調(diào)整是腫瘤細(xì)胞逃避有效免疫療法的常見機(jī)制，目前多個(gè)團(tuán)隊(duì)在開發(fā)同時(shí)靶向多抗原的CAR-T療法。這一策略可以幫助解決腫瘤內(nèi)在異質(zhì)性的問題，從而降低白血病復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。目前的臨床前數(shù)據(jù)支持的多靶標(biāo)手段包括使用單一CAR受體同時(shí)靶向CD-19和CD-20；將抗CD19和抗CD123的CAR-T療法聯(lián)用；使用單一CAR受體同時(shí)靶向CD19和CD22，或者使用靶向著兩種抗原的組合CAR-T療法。目前多項(xiàng)臨床試驗(yàn)在檢驗(yàn)這一策略的臨床效果。這些臨床試驗(yàn)的結(jié)果將幫助研究人員確定是否靶向兩個(gè)不同抗原就可以防止疾病復(fù)發(fā)，還是需要靶向更多抗原才能達(dá)到治愈效果。

       CAR-T療法導(dǎo)致緩解之后鞏固療法的重要性

       基于對(duì)抗原陽性或抗原陰性癌癥復(fù)發(fā)的擔(dān)憂，我們需要考慮如何鞏固CAR-T療法帶來的疾病緩解。對(duì)于目前CAR-T細(xì)胞療法治療的血癌患者，使用同種異體的造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）是一種已經(jīng)被驗(yàn)證的治療選擇。因此，在接受CAR-T治療之后接受allo-HSCT是一個(gè)需要考量的問題，特別是在事先沒有接受過allo-HSCT的患者中。有研究表明，在接受基于CD28共刺激域的抗CD19 CAR-T療法的ALL患者中，大部分隨后接受allo-HSCT的患者的預(yù)后得到改善。

       結(jié)語

       CAR-T細(xì)胞療法是抗癌歷史上前景的療法之一。然而我們?nèi)匀恍枰朔鄠€(gè)障礙，才能將這一療法用于更多癌癥患者。除了癌癥復(fù)發(fā)問題以外，CAR-T療法還需要更好地解決患者接受療法后出現(xiàn)的細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）問題。而且，如何將CAR-T療法擴(kuò)展到治療B細(xì)胞血癌以外的癌癥領(lǐng)域，將是這一領(lǐng)域的另一個(gè)研究前沿。

       進(jìn)一步改進(jìn)產(chǎn)品制造流程是提高治療結(jié)果的重要環(huán)節(jié)。與多種化療構(gòu)成的組合療法類似，靶向多種抗原的策略可能解決腫瘤復(fù)發(fā)的問題，從而提供通向長(zhǎng)期緩解的途徑。在這一研究快步發(fā)展的領(lǐng)域，解決CAR-T療法的局限勢(shì)在必行，只有這樣才能擴(kuò)展CAR-T療法的使用范圍，讓它更為有效，并且具備治愈患者的潛力。

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