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重組腸激酶Enterokinase,CAS:9014-74-8  EC3.4.21.9
重組腸激酶Enterokinase,CAS:9014-74-8  EC3.4.21.9
重組腸激酶Enterokinase,CAS:9014-74-8  EC3.4.21.9

重組腸激酶Enterokinase,CAS:9014-74-8 EC3.4.21.9

更新時(shí)間:2024-11-27

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藥典: 暫無(wú)
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產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品關(guān)鍵詞: 重組腸激酶Enterokinase,CAS:9014-74-8 EC3.4.21.9,,生物制品,試劑,酶
是否為生產(chǎn)商:
產(chǎn)品包裝規(guī)格: 100U,500u,1000u,10ku,1MU
最低訂購(gòu)量: 1
供貨能力: 1000000
交貨周期: 7天
主要銷售市場(chǎng): 北美洲,中/南美洲,西歐,東歐,大洋洲,亞洲,中東
是否提供樣品:
產(chǎn)品描述:

重組腸激酶

Cat.No.: REK08

CAS: 9017-74-8
EC: 3.4.21.9

儲(chǔ)存溫度:-20℃或以下

來(lái)源:重組牛腸激酶,大腸桿菌表達(dá)

蛋白序列氨基酸序列與牛腸激酶輕鏈一致。

 

1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介

雅心重組牛腸激酶是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段。該酶經(jīng)HPLC純化,純度高,特異性高,不含其他蛋白酶。腸激酶可以切割含有四個(gè)天冬氨酸的賴氨酸羧基端肽鍵:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 賴氨酸(DDDDK)??梢栽谳^寬pH范圍(4.5-9.5)和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割融合蛋白。腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標(biāo)簽。

 

2.產(chǎn)品特性

來(lái)源

重組大腸桿菌

外觀

澄清、無(wú)色至淡黃色液體

活性

≥ 5.0 U/µl

純度(蛋白電泳)

單一主條帶

電泳(分子量)

25.8 ±2.6 kDa

單位定義:1U定義為在25℃,12h~16h之內(nèi),將0.5mg保存于25mM Tris-HCl 8.0 緩沖液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。

 

3.推薦使用方法

1)25℃酶切條件:

按照酶活性定義,酶切條件舉例:

25mM Tris-HCl 8.0體系中:

融合蛋白  0.1-1mg/ml(蛋白總量50-100µg)

重組EK   0.1-0.2U

25℃過(guò)夜酶切,或完全酶切需16-24h,用SDS-PAGE檢測(cè)酶切效果。

2)4℃低溫酶切條件:

4℃能對(duì)底物進(jìn)行有效酶切,但需要將酶切時(shí)間延長(zhǎng)至48-64h,或增加2-3倍酶量。

3)酶切優(yōu)化和放大

優(yōu)化:可以對(duì)酶切條件進(jìn)行優(yōu)化,例如緩沖液pH,融合蛋白濃度,EK的量,以及酶切時(shí)間,使融合蛋白能在穩(wěn)定條件下被酶切,用SDS-PAGE檢測(cè)酶切效果。

放大:選擇優(yōu)化后的反應(yīng)條件,按該條件等比例放大,用SDS-PAGE檢測(cè)酶切效果。

  1. 去除重組腸激酶的方法:使用胰蛋白酶抑制劑親和層析(例如sigma T0637)去除重組腸激酶。
  2. 注意:不建議37℃條件下酶切,可能會(huì)有非特異性酶切出現(xiàn)。

 

4.常見(jiàn)影響腸激酶活性的因素

在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影響??蓞⒄找韵峦扑]方法進(jìn)行酶切:

1)為獲得理想酶切結(jié)果,請(qǐng)將樣品透析到25mM Tris-HCl 8.0緩沖液中,再進(jìn)行酶切。

2)若不便透析,可將樣品稀釋,咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白的比例不變(即1U酶切500µg蛋白)。

3)如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種,且不便去除,此時(shí)適當(dāng)增加酶量或延長(zhǎng)酶切時(shí)間,也可達(dá)到較好酶切效果。


5.儲(chǔ)存和運(yùn)輸穩(wěn)定性

酶液儲(chǔ)存穩(wěn)定性:-20℃,24個(gè)月穩(wěn)定;25℃,一周內(nèi),無(wú)活性損失。緩沖體系:50mM Tris-HCl,pH8.0,250mM NaCl,2mMCa2+,50%甘油。

酶液反復(fù)凍融穩(wěn)定性:反復(fù)凍融5次,無(wú)活性損失。

運(yùn)輸穩(wěn)定性:藍(lán)冰保溫運(yùn)輸,穩(wěn)定。

 

6.產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
特異性:特定的蛋白酶,切割前面含有四個(gè)天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn):天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 賴氨酸 (D-D-D--D-K)。


純度高:不含其他蛋白酶,無(wú)非特異性切割。

無(wú)動(dòng)物源性:重組生產(chǎn),無(wú)外源性的病毒污染,生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料。

質(zhì)量穩(wěn)定:批量生產(chǎn),可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn);產(chǎn)品批次間無(wú)差異,質(zhì)量穩(wěn)定。

符合法規(guī)要求:生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求,生產(chǎn)過(guò)程完全遵循NSF ISO 9001:2015質(zhì)量體系并符合GMP指導(dǎo)原則。

質(zhì)量文件完整:按客戶需求,可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。

 

7.相關(guān)產(chǎn)品

重組羧肽酶B;

序列分析純胰蛋白酶;

重組人胰蛋白酶;

重組抑肽酶。

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